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complementtechA120 说明书

 更新时间:2017-09-18 点击量:1354

世界*实验材料供应商 Complement Technology正式授权上海起发为其中国代理, Complement Technology在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海起发一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务,签约 Complement Technology就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获

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Complement Technology前身是Advanced Research 技术公司,ART公司成立于1993年,是一家有着20多年补体研发和生产经验的生物制品公司,为用户提供zui高质量的补体类产品及其它生物试剂产品。公司领导均是有数十年在科研机构从事补体领域研究的科学家,确保了公司产品的地位和*品质。

 

公司主要产品系列:

一、高纯补体蛋白产品系列

该产品系列包括多种高度纯化的补体蛋白产品,包括C1、C1q、C1q (40% Glycerol)C1r EnzymeC1s ProenzymeC1s EnzymeC1 Esterase InhibitorC2 C3 C3C3a C3a desArgC3b iC3bC3cC3d C4C4(concentrated)C4aC4a desArgC4bC4bC5CCC desArgC5b,6C6C7C8C9SC5b-9 ComplexFactor B Factor DFactor HFactor H (conc.)Factor IFactor PCobra Venom FactorFactor BaFactor Bb

二、过敏毒素产品系列

该系列产品包括C3aC3a desArgC4aC4a desArgCCC desArg

 

三、特定因子清除的血清产品

该系列产品包括多种通过免疫亲和色谱清除补体因子的血清产品,具体包括以下补体清除的血清:C1q-Dpl、C2-Dpl、C3-DplC4-Deficient Guinea PigC4-Dpl C5-Dpl C6-DplC7-DplC8-DplC9-DplFactor B-DplFactor D-Dpl Factor H-DplFactor I-DplFactor P-DplC3/C4 Inactivated SerumC1q/Factor D-Dpl 

四、补体相关抗体产品系列

该系列产品为抗补体蛋白的多款抗体产品,适用于多个免疫学及补体研究领域。具体包括Goat Anti-Human C1qGoat Anti-Human C2Goat Anti-Human C3 Rabbit Anti-Human C3aGoat Anti-Human C4Rabbit Anti-Human C4aGoat Anti-Human C5Rabbit Anti-Human rCGoat Anti-Human C6Goat Anti-Human C7Goat Anti-Human C8Goat Anti-Human C9Rabbit Anti-Human SC5b-9 Neo (lgG)Goat Anti-Human Factor B Goat Anti-Human Factor DGoat Anti-Human Factor HGoat Anti-Human Factor IGoat Anti-Human Factor PGoat Anti-Human C1-INH Rabbit Anti-Human Vitronectin

五、血清产品系列

该产品系列包括正常的人、小型猪、大鼠、小鼠血清产品。

六、补体检测相关试剂

该系列产品为多种常用的补体研究缓冲液及红细胞产品:包括GVB缓冲液(含钙镁离子或不含钙镁离子)、GVBE缓冲液 ( EDTA)SGVB缓冲液(低离子强度/葡萄糖)VBS缓冲液 (含钙镁离子)EA (Ab-sensitized sheep E)Es (sheep E)Er (rabbit E)Zymosan (预活化酵母聚糖) MgEGTA缓冲液和MCAR缓冲液。

 

名称:       C5 Protein          

目录号:      A120

尺寸:          250μg/瓶

浓度:           1.0 mg / mL (见实际浓度分析证书)

形式:                          冷冻液体

活性:                      >正常人血清标准> 80%。

纯度:                         > 95%,通过SDS-PAGE

缓冲液:                        10mM磷酸钠,145mM NaCl,pH7.2

消光 Coeff进行。        阿 280 纳米=  1.03以1.0毫克/毫升

分子量:     190,000 Da(2链)

防腐剂:              无,0.22μm过滤

存储:                      -70 Ò C或以下。避免冻融。 

资源:                       正常 人血清(通过认证测试显示为阴性

用于 HBsAg,HTLV-I / II,STS,以及针对HCV,HIV-1和HIV-II的抗体)。

注意事项:               使用正常的注意事项处理人体血液制品。

起源:                        在制造美国。

一般说明

天然人C5是含有两个二硫键的链的天然糖基化(1.6%)多肽。C5对于形成膜攻击复合物(MAC)是必需的,并且被所有三种补体激活途径激活。补体活化的每个途径产生与靶表面结合的蛋白水解酶复合物(C3 / C5转化酶)(Ross,GD(1986))。这些酶在C5的较大的α链中切割肽键,释放的过敏毒素 C(74个氨基酸)并活化C5b。这是C5b-9复合物组装中*的蛋白水解步骤。C5b是不稳定的,但是它保持与活化复合物短暂的时间(约2分钟)结合,在此期间,它将从单独的C6与周围的流体结合形成C5b6 ,或者它衰变和聚集,并且不再能够形成MAC。的体C5b ,6复合物也可以保持结合于C3 / C5转化酶的单一的C7其中结合公开了一个膜结合区和C5b,6,7-可部分插入到双脂质靶细胞的层。到目前为止,复合物可以从靶细胞扩散并进入附近细胞的膜。这被称为旁观者裂解或“反应性裂解”,可能是病理学的重要来源。每个C5b-7复合物可以结合一个C8蛋白质分子,这导致复合物更牢固地插入到膜中。该复合物结合C9并且每个结合的C9可以结合另外的C9起始形成含有多达18个C9分子的环结构(Podack,ER(1984))。与一个或多个C9的C5b-9复合物被称为补体的膜攻击复合物(MAC)。不是所有的C5b-8复合物都有完整的C9环,平均每个C5b-8复合物只有三个C9。C9完成的蛋白质环形成电子显微照片上看到的孔,并导致代谢物和小蛋白质从细胞中泄漏以及水进入细胞的运动。如果足够数量插入细胞膜,则由于渗透压而流入细胞的水会破裂细胞膜,从而释放靶细胞(或旁观者细胞)的全部内容物。任一过程都可能导致细胞死亡。原本以为这只需要每个细胞一个C5b-9复合体(简称“一击”理论)(Rommel FA和Mayer,MM(1973)),但这可能是不正确的,例如红细胞需要大约850个C5b-9复合物,如通过C7分子的数目所测量的,用于裂解发生(Bauer,J。等人(1979))。通过CD59保护免受MAC的宿主细胞需要足够数量的C5b-9至结合所有的CD59,然后再加上大约850个C5b-9,由于其大小和由于这种细胞中存在多种防御机制,有核细胞的裂解需要更多的C5b-9复合物。                                     

物理特性与结构

分子量:  190,000 Da,由两个二硫键连接。α链为115,000Da,β链为75,000Da。α和β链通过二硫键连接。C5 的pI为4.7〜5.5。     

由C3 / C5转化酶切割C5 从α链的N末端释放C(74个氨基酸片段,8268Da脱糖基化,10,400 + 1000个糖基化)。C5b片段(181,000Da)与C6结合以引发膜攻击复合物的自发组装。   

 CAS号:  80295-53-0

功能

参见上面的一般说明。

测定

C5的zui简单的测定法是使用C5耗尽的人血清,并测量作为添加的测试样品或标准纯化C5的浓度的函数的EA(经典途径)或Er(替代途径)的裂解。每个*的应用程序可能需要确定适当的条件。然而,典型的测定法将涉及在湿冰上混合25μL含有GVB ++稀释的C5-Dpl,含有C5的样品以含有1至10ng C5,以及足够的GVB ++使体积达到300μL。zui后应添加以GVB ++稀释的EA(200μL中的3×10 7个细胞)。纯化的C5或正常人血清(NHS)可用作C5的来源。将反应混合物在37℃温育30分钟ö C和1 毫升加入冷GVBE的。然后将反应混合并离心以将未裂解的细胞旋转下来。然后在415nm处分析上清液中释放的血红蛋白,并与不含C5的空白对照(背景裂解对照),并用275μL水代替GVB ++和25μLC5-Dpl(100%裂解对照)孵育细胞。            

 已经使用预先装载有C1(EAC1细胞)的EA或经预处理的经典途径C5转化酶(EAC1423细胞)描述了许多其它测定法。  然而,所有这些测定都需要使用多种纯化的补体成分或更难以准备的试剂(Dodds,AW和Sim,RB(1997); Morgan,BP(2000); Tack,BF等(1981) )。

应用

参见上面的一般说明。

体内

C5的正常血清浓度为75μg/ mL (正常范围为55〜113μg/ mL)。  合成的主要部位是肝脏,但C5也在肺(由II型肺泡细胞),脾,肠,单核细胞和巨噬细胞中制成 。刺激许多其他补体蛋白增加生物合成的细胞因子不影响C5表达水平。C5不是急性期蛋白。   

 许多蛋白质和其他血浆成分对C5b-9复合物的溶解活性具有抑制作用。  大多数可以在C5b-7 期  后与形成复合物相互作用如果含有C5b的复合物不能插入膜中,它们可能自我聚集或结合到zui普遍的S蛋白的调节蛋白。  S蛋白(也称为玻连蛋白)是一种80,000Da血浆蛋白,与不能插入靶细胞膜的C5b-9复合物结合。这减少对附近宿主细胞的损害。许多其他血清组分抑制或部分地由体C5b-9抑制裂解和这些包括SP40 ,40(也被称为簇和载脂蛋白 J)和许多血浆脂蛋白复合物(LDL,HDL等)。   

没有C5b 失活剂对于C3b或C4bBP和因子I对于C4b起到像H和I的因子的作用。  也就是说,C5b不是 通过任何已知的系统蛋白水解转化成iC5b形式的。

宿主细胞通过各种机制保护自己免受C5b-9的侵害。膜蛋白DAF,MCP和CR1抑制C3 / C5转化酶的形成,防止MAC形成。CD59,也被称为“同源限制因子”和“ 保护素 ”,是 细胞膜的 18,000至20,000Da普遍存在的组分,其在结合并抑制 C5b-8和C5b-9复合物的溶解电位方面非常有效。CD59的物种特异性不是的,许多哺乳动物CD59确实抑制或部分抑制其他物种的MAC。观察到的特异性似乎是由于一种动物的C8与另一种动物的CD59之间的不相容性。像DAF一样,CD59含有一个GPI锚(一个插入到细胞的胆脂层的翻译后添加的脂质尾巴)。疾病PNH由附着GPI尾部的酶的丧失引起,从而剥夺细胞使C3 / C5转化酶失活的能力和使C5b-9失活的能力。这导致对长寿命血细胞如红细胞和血小板的补体介导的损伤和zui终的裂解。             

 在大多数由IL-1,IL-6,TNF-α和LPS合成C5的细胞中C5的生物合成被上调。

遗传学

人染色体位置9q 32-34。登录号M57729。小鼠染色体2. 登录号J05234。人类基因组结构:该基因跨越79 kb与41个外显子。     

不足之处

由于在实验室近交小鼠的育种期间的早期步骤中损失,大量常见的小鼠品系缺乏C5。  六个C5缺陷株是常见的A / HeJ,AKR / J,DBA / 2J,NZB / B1NJ,SWR / J和B10.D2 / oSnJ。  由于在cDNA的5'末端附近存在两个碱基对缺失,所有缺少C5 。  显然,生存不依赖于C5或形成MAC的能力,然而,这些小鼠已显示出许多免疫系统异常,并且通常更易感染许多感染性疾病。类似地,已经报道了几个C5缺陷家族。C5缺乏的人类具有严重受损的杀菌和趋化活性。反复感染是常见的,奈瑟氏球菌属物种是一个特别严重的问题。     

疾病

  见上述缺陷。

注意事项/毒性/危险

这种蛋白质从人血浆中纯化,因此必须使用适合于处理任何血液衍生产品的预防措施,即使通过认证测试证明该来源对于HBsAg,HTLV-I / II,STS和HCV抗体是阴性的, HIV-1和HIV-II。       

仅供研究使用。

不适用于人或药物使用。

 

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