美国phynexus公司是美国的分子生物学试剂耗材供应商，上海起发实验试剂有限公司为您带来phynexus公司的产品和服务

PhyNexus 蛋白质G PhyTip柱说明书

Protein G PhyTip Columns

蛋白质G PhyTip柱

蛋白质G PhyTip柱显示功能性抗体（IgG）的高结合亲和力和高选择性亲和纯化。蛋白G柱显示出对不同同种型和IgG种类的高选择性，并获得高度浓缩的纯化蛋白

• 高结合亲和力
• 对不同物种的高选择性和抗体的同种型
• IgG回收率为70-90％

使用我们专有的双流式色谱法  提供的蛋白G提示可  提供完整的抗体结合和高终浓度。PhyTip色谱柱兼容大多数8,12和96通道自动化液体处理机器人，包括  Agilent Technologies，  Beckman Coulter，  Dynamic Devices，  Perkin Elmer，  Hamilton和  Tecan。

含有蛋白G的PhyTip色谱柱

含有蛋白G的PhyTip色谱柱已经过优化，可用于特定的PhyNexus试剂和仪器流速/体积，如下所示。使用PhyTip ME 1000和ME 200纯化系统收集该信息

所有带有蛋白G的PhyTip色谱柱都配有推荐的PhyTip缓冲液，包括：捕获缓冲液 - 适用于需要添加额外缓冲液以补充样品体积并确保正确捕获pH值的情况。洗涤缓冲液I - 磷酸盐缓冲溶液pH 7.4洗涤缓冲液II - 盐水溶液。注意：没有缓冲能力以确保有效洗脱富集缓冲液 - 用于终洗脱步骤 - 磷酸盐缓冲溶液pH 2.5中和缓冲液。 - Tris缓冲溶液pH 9.0

注意：富集缓冲液以4 mL pH 2.5磷酸盐缓冲溶液的形式提供，如果要纯化的蛋白质需要较少的酸性洗脱条件，例如pH 2.8，则可以如下更改富集缓冲液的pH值：取1 mL标准富集缓冲液（pH值） 2.5）加入30μL1MTris Buffer标准中和缓冲液，得到1 mL pH 2.8洗脱缓冲液（实际pH值可能因体积精度而异）对于pH 3.0浓缩缓冲液，取1 mL标准富集缓冲液（pH 2.5） ）加入40μL1MTris Buffer标准中和缓冲液，得到1 mL pH 3.0洗脱缓冲液（实际pH值可能因体积精度而异）

对于中和步骤，添加25％v / v的洗脱体积，例如，如果洗脱体积为20μL，则添加5μL的1M Tris中和缓冲液

含有蛋白G树脂的200多个PhyTip色谱柱：

对于含有1mg BSA的5μgIgG2a（抗FITC MAb。）的200μL样品，使用下面显示的条件处理，在终样品体积中回收大于40％的原始IgG质量。此外，通过用考马斯检测的SDS-PAGE测定，回收的IgG纯度超过95％。

捕获：通过树脂床以250μL/分钟的流速通过树脂床捕获200μL样品。

纯化：200μLPhyNexusProtein G洗涤缓冲液I，以500μL/ min的流速通过树脂床两个循环，然后用洗涤缓冲液II进行第二次洗涤，在树脂床上通过两个循环流动速率为500μL/ min。

富集：用10μLPhyNexusProtein G Enrichment Buffer将蛋白质洗脱到溶液中，以500μL/ min的流速通过树脂床5个循环。用3μLPhyNexus蛋白G中和缓冲液中和。

出厂时含有的蛋白G富集缓冲液含有：111mM NaH2PO4,140mM NaCl，14.8mM H3PO4，pH3.0

含有蛋白G树脂的1000多种PhyTip色谱柱：

对于含有5μgBSA的10μgIgG2a（抗FITC MAb。）的500μL样品，使用下面显示的条件处理，在终样品体积中回收大于40％的原始IgG质量。此外，通过用考马斯检测的SDS-PAGE测定，回收的IgG纯度超过95％。

捕获：通过树脂床以250μL/分钟的流速通过四个循环捕获500μL样品。

纯化：1000μLPhyNexusProtein G洗涤缓冲液I，以500μL/ min的流速通过树脂床两个循环，然后用洗涤缓冲液II进行第二次洗涤，以500的流速通过树脂床两个循环。 μL/分钟。

富集：用15mL PhyNexus Protein G Enrichment Buffer将蛋白质洗脱到溶液中，以500μL/ min的流速通过树脂床5个循环。用5μLPhyNexus蛋白G中和缓冲液中和。

PhyTip色谱柱是PhyNexus*的捕获，纯化和富集TM工具，专为微量蛋白质样品制备而设计。PhyTip色谱柱适用于各种液体处理平台，并含有特定的亲和树脂，可满足特定应用要求。

PhyNexus建议使用含有IgG的PhyTip入门试剂盒作为标准，以验证所有应用中PhyTip色谱柱的使用。

用于纯化和富集的样品必须清澈且无颗粒物质。在与PhyTip色谱柱一起使用之前，强烈建议离心样品并仅使用澄清的上清液。

运输和存储

每包PhyTip色谱柱均按照高标准生产和质量控制，并在保留盒中运输，以保持每个PhyTip色谱柱中特定亲和树脂的完整性。本产品在环境温度下运输，但收到后应存放在4到8℃的标准实验室冰箱中。

• 不要冷冻或储存冷冻。
• 不使用时，请将盒盖关闭并密封，存放在冰箱中。
• 在干燥环境中长时间储存​​，不要让亲和树脂干燥。

含有蛋白G的PhyTip色谱柱在从PhyNexus发货时储存在甘油中。

Protein G PhyTip色谱柱可用于这些机器人系统。