prozyme PNGase F产品
PNGase F,肽-N- 糖苷酶F,肽-N 4 - (N- 乙酰基-β-葡糖胺基)天冬酰胺酰胺酶,通过切割N-聚糖 的内部GlcNAc和天冬酰胺(Asn)之间的切割,从而获得完整的N-聚糖。)N-聚糖与肽连接的残基。
通过用热/ SDS处理使糖蛋白底物预先变性大大提高了N-聚糖去除的速率和可靠性,尽管在较高浓度下酶可以在天然条件下从糖蛋白中除去完整的聚糖。使用PNGase F进行快速(5分钟)去糖基化是我们Gly- X样品制备平台的一部分。
我们提供了许多不同的配方和包装尺寸的PNGase F:
产品/包装尺寸 | 浓度 | 重组 | EDTA |
GKE-5006A (100 mU), GKE-5006B (200 mU), GKE-5006D (1 U) | ≥2.5U / ml | ✔ | 1mM的 |
GKE-5016A (100 mU), GKE-5016B (200 mU), GKE-5016D (1 U) | ≥2.5U / ml | ✔ | 0 |
GKE-5016B (200 mU), GKE-5016D (1U) | ≥10U / ml | ✔ | 1 mM |
GKE-5020B (200 mU), GKE-5020D (1 U) | ≥10U / ml | ✔ | 0 |
GKE-5003 (100 mU) | ≥2.0U / ml |
| 5 mM |
一个单位的N-聚糖酶定义为在pH7.5和37℃下每分钟催化1μmole变性核糖核酸酶B释放N-连接寡糖所需的酶量。
缓冲剂和变性剂不提供1 U“D”包装尺寸,但可根据要求提供。
历*将EDTA包括在天然PNGase F制剂中作为稳定剂。对于GKE-5020配方,我们重新考虑了这个想法,因为客户要求不使用EDTA的PNGase F配方。我们相信稳定性不如酶的重组形式所关注。
尺寸
500个单位
选择目录号: V4831
PNGase F(肽 N-糖苷酶 F)是一个重组糖苷酶,从 Elizabeth-kingia miricola 克隆,并在大肠杆菌中过表达获得。PNGase F 的分子量为 36kDa, 可以在 N-连糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分内侧的 N- 乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间进行切割(图1)。PNGase F 不会去除常见植物糖蛋白上含有核心α-(1,3)- 岩藻糖连接的寡糖。
单位定义:一单位 PNGase F 指在 37℃可以 1 分钟内催化 1nm 变性核糖核酸酶 B(RNase B)去糖基化所需 PNGase F 的量。1 Promega 单位等于 1 IUB 毫单位。
分子量:PNGase F 分子量约为 36kDa 。
物理形态:PNGase F 溶于 20mM Tris-HCl(pH 7.5,25℃),50mM NaCl和 5mM EDTA缓冲液中,浓度为10,000u/ml。
应用:
• 蛋白是否被糖基化的特征
• 确定蛋白的糖基化位点
• 聚糖结构特征
• 蛋白运输
PNGase F对N-聚糖的切割特异性。
重组PNGase F使多种底物去糖基化。
示意图说明了PNGase F的使用和N-糖基化的质谱分析。