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ScienTech KTS-01说明书
PAP (Pyrophosphorolysis-activated polymerization)/ KlenTaq-S
PAP（焦磷酸解 -活化聚合）/ KlenTaq -S
PAP是一种*的DNA扩增方法（Liu和Sommer：BioTechniques，29 [2000]，1072-1080; Nucleic Acids Res，30 [2002]，598-604），其中焦磷酸解 和聚合通过DNA聚合酶使用3连续偶联。 '封闭的底漆。 焦磷酸解是DNA聚合的逆反应，其中在无机焦磷酸盐存在下酶除去引物模板双链体3'末端的封闭核苷酸（通常是双脱氧）。在通过焦磷酸解作用除去封闭的核苷酸后，然后可以通过DNA聚合延长活化的引物。
由于PAP 的高特异性（1 / 3x10 11） ，该过程正成为 在大量过量野生型等位基因存在下检测稀有突变，大杂合缺失，基因重复等的有力工具（Liu et al：Biotechniques），40 [2006]，661-668）。理论上，PAP可以检测3× 10 11个野生型等位基因中的单个碱基突变。
PAP可以被用来作为一种替代或证实的实时PCR （Boon等人： Prenat DIAGN 27 [2007]，932-937）
KlenTaq -S和PAP反应。
已经发现KlenTaq -S是 PAP反应中许多研究小组的合适的热稳定 Taq DNA聚合酶。
KlenTaq -S由该基因的5'缺失和F667Y（Tabor和Richardson）突变表达，编码Thermus aquaticus DNA聚合酶。反复暴露于98 0在PR1反应C缓冲区的酶不显示活性的任何显着损失。
KlenTaq - S的浓度： 10U /μl
建议的PAP反应条件（25μl ）：
50 mM Tris-HCl，7.8,16 mM硫酸铵，3.5 mM 氯化镁， 25μM，每种四种dNTP，每种引物0.1μM，5-200 ng 模板，90μM无机焦磷酸盐（Na 4 PPi），2％二甲基亚砜（DMSO） ），2.5 U KlenTaq -S。
骑行条件：
95 0 Ç 为 1分钟（变性），然后
94 0 C持续15秒
60 0 C持续30秒
64 0 C持续30秒
68 0 C 1分钟
72 0 C持续1-2分钟，共25-45个循环
提供缓冲液 （ 10X PR1）：
500 毫米 的Tris-HCl，pH值7.8，160 mM的 （ NH 4）2 SO 4，35 毫的MgCl 2，1.5毫克/毫升BSA
订购信息：
订货号 ：KTS-01
数量： 100μl或1000 U /小瓶
价格： $ 200 /小瓶（1000 U）
运费： 美国35美元（FedEx隔夜）
