mypols VolcanoCell 2G RT-PCR 2x预混液
€180,00
该混合物已针对直接电池应用进行了专门优化。
跳过耗时且昂贵的RNA纯化。VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix使您能够直接从细胞悬液或细胞裂解物中定量和检测RNA，而无需纯化步骤。只需分离细胞，将细胞悬浮液直接添加到RT-PCR反应混合物中，放入实时仪器中，然后开始即可。
可选地，使用裂解缓冲液直接在孔或烧瓶中裂解细胞，只需旋转并直接将上清液添加到RT-PCR混合物中即可。
裂解物也可以冷冻并储存在-20℃。
跳过逆转录步骤。不需要等温逆转录步骤。
Volcano2G是一种具有PCR活性的逆转录酶，非常稳定，在95°C下的半衰期> 40分钟。
当添加实时PCR染料时，Volcano2G DNA聚合酶也可用于实时PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶样核酸酶结构域，使其也适用于基于水解探针的分析。如此处所示，通过使用基于探针的qPCR分析和零步RT-PCR方案，使用总RNA的10倍稀释系列检测了NONO mRNA。
对于细胞RNA的可靠RT-PCR，样品制备步骤*。然而，这些步骤费力，费时并且需要额外的消耗品。使用我们的VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液，您可以用快速便捷的“零步长”方案代替费力的RNA制备。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液具有简化的“零步骤”工作流程，使您可以规避费力的纯化和提取步骤，从而节省了时间和金钱。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x实现了低至单个细胞的检测灵敏度。在此示例中，按照VolcanoCell2G协议从单个隆德人中脑（LUHMES）细胞中检测到GAPDH mRNA。
具有更多示例的出版物可以在“出版物”部分中找到。
该试剂盒包含一种经过工程改造的，极耐热的逆转录酶和组合的DNA聚合酶，包括经过特殊优化的缓冲液系统，该系统仅需要少量细胞（100至10.000个细胞）。试剂盒中还包含一个单独的50x裂解缓冲液。
包含的Volcano2G DNA聚合酶经过多代定向，人工进化工程化，在95°C下的半衰期> 40分钟。它可直接从细胞悬液或裂解物中进行“零步” RT-PCR，而无需等温逆转录步骤。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x预混液包含所有标准实时循环仪仪器中成功且可靠的RT-PCR所必需的所有组分，并且与常见的RT-PCR检测方法兼容，例如荧光实时PCR染料或荧光探针。
推荐的扩增子大小应在60-300 bp之间。
请注意，必须使用跨外显子-外显子连接的引物，以仅将扩增限制在mRNA靶标上。
通过避免昂贵，费时的细胞裂解或RNA纯化，VolcanoCell试剂盒是高通量应用，RNAi敲除或基因表达实验的理想选择。预备2x混合可确保可重复的RT-PCR结果，显着减少设置时间并发生错误的风险。只需要添加引物和模板。使用随附的裂解缓冲液可以轻松制备细胞裂解液。但是，理想的扩增子大小应在60-300 bp之间！
存储：
该产品以凉爽包装出售。请在抵达时将产品存放在-20°C下。通过分装保存，大程度地减少冻融循环次数。对于日常使用，我们建议将等分试样保持在4°C下。
RT-PCR活性： 对HEK细胞在1x裂解缓冲液中的系列稀释液进行了成功的RT-PCR性能测试。151 bp片段（HPRT1 mRNA）在实时PCR循环仪中扩增，并可视化为单个扩增产物。
DNA聚合酶活性：使用人工DNA模板和DNA引物监控Volcano3G DNA聚合酶活性并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。
酶浓度由蛋白质特异性染色确定。请通过info@mypols.de查询有关特定批次浓度的更多信息。
裂解缓冲液：将HEK细胞在1x裂解缓冲液中进行系列稀释，测试其成功的RT-PCR性能。151 bp片段（HPRT1 mRNA）在实时PCR循环仪中扩增，并可视化为单个扩增产物。
