上海起发haemtech活化蛋白C现货
Activated Protein C
活化蛋白C(APC)使因子Va失活
代表了APC对因子Va的蛋白水解失活,其中:PS =蛋白S,PCPS =磷脂囊泡(或细胞表面),Ca ++ =钙离子。因子Va失活形成因子Vai的原因是APC在三个特定位点对因子Va重链(94K)进行了蛋白水解(实心箭头)(1,2)。这些切割位点在因子Va重链中的位置如下:(人:R306,R506和R679)和(牛:R306,R505和R662)。辅因子分子的*灭活需要在精氨酸306位裂解。活化蛋白C在精氨酸306上的切割仅在存在膜的情况下发生,并且需要事先在精氨酸505上重链的切割。APC对因子Va轻链进行的蛋白水解仅在牛分子中发生,并且对于灭活不是必需的(虚线箭头)。
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ H 2 O |
存储 | -20°摄氏度 |
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纯度 | 通过SDS-PAGE,> 95% |
活性测定 | 显色测定 |
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保质期(正确存放) | 12个月 |
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 20 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.4 |
存储 | -80°摄氏度 |
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纯度 | 通过SDS-PAGE,> 95% |
活性测定 | 显色测定 |
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保质期(正确存放) | 12个月 |
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ H 2 O |
存储 | -20°摄氏度 |
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纯度 | 通过SDS-PAGE,> 95% |
活性测定 | 显色测定 |
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保质期(正确存放) | 12个月 |
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 20 mM Hepes,150 mM NaCl,pH 7.4 |
存储 | -80°摄氏度 |
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纯度 | 通过SDS-PAGE,> 95% |
活性测定 | 显色测定 |
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保质期(正确存放) | 12个月 |
活化蛋白C(APC)是一种抗凝血丝氨酸蛋白酶,来源于两条链,依赖于维生素K的酶原,蛋白C(3-7)。α-凝血酶和血栓调节蛋白之间的复合物催化蛋白C重链中Arg-12(牛中的Arg-14)的单裂,从而生成活化的C蛋白。几种非生理相关的蛋白酶,例如RVV-X激活剂,胰蛋白酶和PROTAC也能够激活C蛋白。
APC用作抗凝血剂,可催化辅因子Va和VIIIa因子的蛋白水解失活,从而导致凝血酶原酶和Xase因子复合物的抑制。因子Va和VIIIa的失活都是Ca2 +和磷脂依赖性的。维生素K依赖的辅因子蛋白S通过与APC形成1:1的复合物(Kd = 6x10-9M)适度提高了失活率(8)。
有几个因素减弱了APC的抗凝活性。Xa因子通过竞争因子Va上相似的结合位点来保护因子Va免受APC的蛋白水解作用。凝血酶也已被提出通过蛋白S的蛋白水解失活作为APC的调节剂。此外,APC还受循环肝素依赖性蛋白的调节C抑制剂(PAI-3),肝素非依赖性循环蛋白C抑制剂,血小板衍生的蛋白C抑制剂和PAI-1。据报道,在APC和两种PAI类型之间形成的复合物可说明在输注APC或体内产生APC时观察到的纤维蛋白溶解增加。
除了我们的标准APC制剂外,还可以使用含有Dansyl-EGR-氯甲基甲酮的活性位点封闭形式。
活化的蛋白C是由纯化的蛋白C通过凝血酶激活,然后进行离子交换色谱法制得的(4)。APC以50%(体积/体积)甘油/水的形式提供,应储存在-20oC下。通过SDS-PAGE分析确定纯度,并使用生色底物测定法测量活性。还按照APC耐药性分析的要求测试了所有生产批次的APC延长正常人血浆aPTT的能力(10,11)。该测试的结果以aPTT(+/- APC)比(10nM APC)的形式提供给每个批次。
凝胶 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加载 | 人类aPC,每泳道1 µg |
缓冲 | 拖把 |
标准 | 参见BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脱氢酶(51 kDa),酒精脱氢酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
本土化 | 等离子体 | ||||||||
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行动方式 | 抗凝血剂,可灭活因子Va和VIIIa | ||||||||
分子量 | 56,200(人类)(5) 52,650(牛)(5) | ||||||||
消光系数 |
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等电点 | 4.4-4.8(人)(9) 4.2-4.5(牛)(9) | ||||||||
结构体 | 两条链,Mr = 35,000和21,000,二硫键连接,NH2-末端gla结构域,两个EGF结构域 | ||||||||
碳水化合物百分比 | 23%(人类)(5) 14%(牛)(5) | ||||||||
翻译后修改 | 11个gla残基(牛),9个gla残基(人),1个β-羟基天冬氨酸 |