microgembio核酸提取试剂盒

RNA GEM是一种完整的核酸提取试剂盒，提供了一种非常简单的方法来从单个细胞提取100,000个细胞的RNA 。该套件包含无RNase的酶，缓冲液和DNase I，非常适合处理：

• 哺乳动物细胞培养
• 激光捕获显微切割（LCM）

• 荧光激活细胞分选（FACS）准备的细胞群

核糖核酸

从哺乳动物细胞培养，激光捕获显微切割和FACS准备的细胞群体（例如巨噬细胞）中提取RNA

适用于RT-PCR和RT-qPCR

每个试剂盒均包含RNAGEM，DNase I，BLUE缓冲液，10x DNase缓冲液和10x TE

该图显示了100、500和1,000个反应试剂

RNA GEM是一种完整的核酸提取试剂盒，提供了一种非常简单的方法来从单个细胞提取100,000个细胞的RNA。该试剂盒包含无RNase的酶，缓冲液和DNaseI。它能够从哺乳动物细胞培养物，激光捕获显微切割和FACS制备的细胞群（例如巨噬细胞）中进行温度控制的快速制备RNA。

• 简化的手动工作流程可在5分钟内提供RT-PCR和RT-qPCR就绪的RNA
• 在广泛的细胞数量内以优异的线性释放RNA和DNA
• 无需进一步纯化RNA即可进行准确的RT-PCR和RT-qPCR分析
• 不含抑制剂意味着无需进行苛刻的化学清洗或多个步骤
• 减少的处理可保护样品的完整性

RNA提取工作流程

*，由于RNA分子的低稳定性和大量的RNase，RNA的提取是一个困难的过程。MicroGEM的RNAGEM通过极快的温度控制的RNA提取解决了这一问题，该提取可同时裂解细胞并消除RNase。RNAGEM试剂盒高度适应各种提取体积，并可以根据细胞数量进行缩放。提取后，包括可选的DNase处理以富集RNA。RNA立即可用于下游应用，例如RT-PCR和RT-qPCR。可以将这些试剂直接添加到RNA样品中，以进行简单的流线型96孔板操作。

RNAGEM经过优化，可与多种不同的培养类型一起使用，包括悬浮细胞，贴壁细胞，RNAlater™中存储的细胞，细胞沉淀以及FACS和LCM。

提取工作流程

所述RNA GEM试剂盒允许总核酸提取或根据需要的RNA的提取只是。共纯化RNA和DNA的方案非常快捷，只需5分钟即可从样品变为核酸。单独的RNA可以通过添加DNase（试剂盒提供）进行纯化，这又会增加10分钟的操作时间。该图总结了共纯化和RNA提取工作流程。

RNA GEM与聚合酶和逆转录酶兼容，提取物无需纯化即可用于PCR，RT-PCR，qPCR和RT-qPCR。这导致在广泛的细胞数目范围内更高的灵敏度和线性度。

将HeLa细胞中的5 µl RNA GEM提取物直接添加到RT-qPCR中后，获得此处的图  。RNA GEM提取的细胞数量为10 – 50,000，  并从高丰度mRNA（ACTB;ß-actin）和低丰度mRNA（BRCA1;乳腺癌早期发作）生成图。梯度类似于标准品的干净痕迹表明没有抑制作用，从少至10个细胞中获得的图表明了该方法的灵敏度。

从一系列10-50,000个细胞的HeLa细胞稀释液中提取的RNA的RT-qPCR图。A：高拷贝数mRNA（ACTB）B：低拷贝数mRNA（BRCA1）。红色=标准；蓝色=重复的mRNA曲线。

使用推荐的方法，RNA GEM提取的效率在  1到大约100,000个细胞的范围内是恒定的，并具有出色的产量（请参阅下文）。相反，TRIzol®提取会损失低丰度细胞的mRNA。这意味着可以通过简单的非DNase处理的提取物中gDNA的qPCR获得样品归一化。