eaglebio 14D39-K01 0说明书

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14,15 DHET ELISA Assay Kit

SKU: 14D39-K01 0

Eagle Biosciences 14,15 DHET ELISA分析试剂盒旨在通过酶联免疫法（ELISA）定量测定生物样品中的14,15 DHET。Eagle Biosciences 14,15 DHET ELISA分析试剂盒仅供研究使用，不得用于诊断程序。

14,15 DHET ELISA分析试剂盒

仅供研究使用

大小：1×96 
孔灵敏度：0.01 ng / ml 
动态范围：0.01 – 1000 ng / ml 
孵育时间：2.5小时
样品类型：血清，血浆，组织，生物液体
样品量：100 µl

在美国制造的产品

分析背景

这种竞争性的14,15 DHET ELISA分析试剂盒用于测定生物样品中的14,15-DHET水平。14,15 DHET ELISA分析试剂盒的特异性已发表。14,15-DHET水平与啮齿类动物的高血压，脑损伤和中风表现出强烈的正相关性。14,15-DHET是可溶性环氧化物水解酶介导的EET代谢的代表代谢物，它是由细胞色素P450的花生四烯酸环氧酶活性产生的。使用14,15-DHET ELISA试剂盒测量了人类血液中的14,15-DHET水平。通过14,15-DHET ELISA检测到的人细胞14,15-DHET水平升高表明癌细胞具有肿瘤性和转移性表型。此14,15 DHET ELISA分析试剂盒可用于测定血清，血浆，细胞，和组织经过适当的分离和纯化。以下页面提供了有关正确分离和纯化的说明。 

该竞争性ELISA试剂盒基于14,15-DHET表位与14,15-DHET-HRP共轭物之间的竞争，可从抗14,15-DHET抗体中获得有限数量的结合位点，并将其包被到96孔ELISA板。每个样品中的结合物浓度保持恒定，而14,15-DHET的浓度则根据样品或标准品的浓度而变化。因此，能够与每个孔结合的14,15-DHET缀合物的量与标准品或样品中14,15-DHET的浓度成反比。然后，通过添加TMB时获得的颜色量确定结合至每个孔的缀合物的量。TMB与井中可用的HRP反应。加上硫酸，

测定步骤

1. 将200微升样品稀释缓冲液装入空白（BL）孔中，并将100微升样品稀释缓冲液装入大结合（BO）孔中。
2. 将每种标准品的100微升装入适当的孔中。
3. 将每个样品100微升装入适当的孔中。
4. 将100微升稀释的14,15-DHET-HRP共轭物装载到BO孔，标准孔和样品孔中。不要在BL孔中添加HRP共轭物。
5. 将板在室温下孵育两个小时。
6. 每孔用400微升稀释的洗涤缓冲液洗涤板3次。
7. 在三个洗涤循环中的后一个循环之后，将板拍干在一些纸巾上。
8. 将200微升的TMB底物添加到所有孔（包括BL孔）中。
9. 在室温下将平板孵育15-30分钟。
10. 向所有孔中添加50微升2 N硫酸。
11. 在450 nm处读取板。

典型标准曲线