abvector ＃H15说明书
| FoldHelper™-104和FoldHelper™-104P |
＃H15和＃H16 | |
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| 图1. Hsp104在用FoldHelper™-104感染的昆虫细胞中的表达。 感染后60小时收获 Spodoptera frigiperda Sf9细胞，在50 mM Tris-HCl pH 8.0、150 mM EDTA，0.5％NP-40中溶解，并通过在30,000g下离心15分钟去除不溶级分。可溶性蛋白在11％SDS-PAGE中分离，并用考马斯亮兰染色。NC阴性对照杆状病毒，不表达任何外源蛋白质或多面体蛋白（目录号C13）。 | 推荐用途： 与任何产生细胞质 蛋白聚集体的重组杆状病毒共感染。 | |
| FoldHelper™-104提供酵母Hsp104（Acc＃AAA50477）的表达。Hsp104属于分子伴侣的Hsp100 / Clp组，其可用作逆转而不是防止蛋白质聚集的工具（Glover JR和Tkach，JM，Biochem.Cell Biol。，79：557-568，2001）。Hsp104具有重塑活性，可作用于捕获的聚集蛋白。Hsp104需要与特别是属于Hsp40和Hsp70家族的常规伴侣进行特定的相互作用，以促进其产生的中间体的重折叠（Glover JR和Lindquist S.，Cell，94：73-82，1998）。酵母Hsp104可以在异源系统中起作用，例如，它可以减少哺乳动物细胞中外源蛋白的聚集（Bao YP等，J.Biol.Chem。，277：12263-12269，2002）。 FoldHelper™-104P提供与FoldHelper™-104相同水平的Hsp104表达。另外，它提供了蛋白质二硫键异构酶（PDI）（Acc＃CAA28775）的高水平表达。已证明PDI在体外氧化蛋白折叠中是有效的（Weissman，JS和Kim PS，Nature，365：185-188，1993）。PDI具有多种功能，尽管在ER中丰富，但也存在于细胞质中（Turano，C。等，J.Cell.Physiol。，193：154-163，2002）。 尽管PDI在感染了重组杆状病毒的昆虫细胞中具有无法解释的作用，但令人欢迎的是PDI可以提高此类细胞的寿命。这种细胞病变效应在表达高水平PDI的受感染细胞中明显不明显，并且这种细胞比未提供PDI表达的对照病毒感染的细胞存活约24小时。类似地，哺乳动物细胞中PDI的过表达导致重组蛋白生产的寿命延长和时间延长（Kitchin，K和Flickinger，MC，Biotechnol.Progr。，11：565-574，1995）。 如果您尚未使用杆状病毒表达系统（也称为杆状病毒表达载体系统或BEVS）工作，可以在TECHNOLOGY上进行快速更新。转到BACULOVIRUS教程有关杆状病毒转染，重组杆状病毒繁殖和重组杆状病毒蛋白表达研究的简单在线说明。 | ||
