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akoyabio空间分辨,多重免疫荧光的全面解决方案

 更新时间:2020-10-12 点击量:3874

Akoya Biosciences是Akoya Biosciences,Inc.(一家特拉华州公司)的注册商标,而Spatial Biology Company是Akoya Biosciences,Inc.的商标。 

akoyabio空间分辨,多重免疫荧光的全面解决方案

表征组织微环境的复杂性是理解驱动疾病以及治疗反应的分子和细胞机制的关键要素。

浸润的免疫细胞和细胞基质重塑之间的空间关系作用被广泛认为是定义组织异质性的关键成分。CODEX系统使研究人员能够以单细胞分辨率对组织样品中的40多种蛋白质标记物成像。高度复用的成像技术可以研究不同的细胞表型,以及它们如何在原位相互作用以影响疾病的病理和进展。

CODEX Vornoi图

 

CODEX技术

CODEX(通过indEXing进行共检测)技术使用与专有Akoya条形码偶联的抗体,该条形码由*的寡核苷酸序列组成。CODEX分析法使用染料标记的Reporter靶向特定条形码,以进行高度特异性的检测。

用CODEX抗体板对组织样品进行单步染色,然后Reporters通过成像和去除的迭代循环与互补条形码结合。循环由CODEX流体力学仪器*自动化。

灵活

为新鲜的冷冻或FFPE组织设计定制面板

样品友好

可以对样本重新成像以进行感兴趣区域(ROI)分析

可扩展

以单细胞分辨率在单个组织样本中成像40+个标记

全面

包括试剂和软件分析套件

CODEX复用成像示例

CODEX解决方案与许多组织类型和格式兼容。

乳癌组织用36重CODEX面板染色

 

人类乳腺FFPE组织被36重面板染色

  • 钙粘蛋白
  • KRT19
  • KRT17
  • 肌动蛋白
  • Ki67
  • CD31
  • DAPI

用28重CODEX面板染色的肺癌组织

 

肺癌FFPE组织被28重面板染色

  • 泛细胞角蛋白
  • CD8
  • Ki67
  • PD-L1
  • PD-1
  • CD68

 

人体皮肤新鲜的冷冻组织沾有26层面板

  • 泛细胞角蛋白
  • CD138
  • CD49f
  • CD45
  • CD34
  • Podoplanin
  • CD31

 

固定人PBMC并用26重面板染色

  • Ki67
  • CD45
  • CD2
  • CD31
  • CD63
  • CD45
  • CD7

 

肾细胞癌FFPE组织用15重面板染色

  • Ki67
  • CD8
  • CD4
  • Podoplanin
  • SMA
  • CD20
  • CD31

实验工作流程

01

弄脏

使用CODEX抗体面板准备和染色组织只需一步即可,从而减少了周转时间并保持了样品完整性。

02

图片

全自动CODEX仪器和配套显微镜在您的组织中对40多个标记图像进行成像。用户可以将目标分辨率降至20倍的单细胞分辨率,将目标分辨率降至40倍的亚细胞分辨率。

03

分析

使用全面的CODEX软件套件处理,分析和可视化图像。用户可以访问可视化工具,如用于细胞表型的门控和聚类。用户还可以导出文件以在第三方软件中使用。

医学博士安德拉斯·阿·赫兹(Andras A Heczey)

丹·L·邓肯综合癌症中心儿科肿瘤学助理教授

贝勒医学院

输液后活检非常珍贵……借助CODEX,我们的目标是从组织的小样本中获取多的数据,以尽可能多地了解肿瘤的微环境。

Garry Nolan博士

Rachford和Carlota A. Harris微生物学和免疫学系教授

斯坦福大学,Akoya Biosciences联合创始人

CODEX的商业发布是我实验室的一个里程碑,也是生物医学科学的一个令人兴奋的机会。同时经济地分析完整组织上数十种或更多种蛋白质标记的能力将从根本上改变我们对细胞相互作用和疾病生物学的理解。

实例探究

范德比尔特糖尿病中心的Powers&Brissova研究小组使用CODEX来研究胰岛微环境。

 

斯坦福大学的细胞科学成像设施(CSIF)通过CODEX系统上的多重成像项目扩展了其核心实验室服务。

 

宾夕法尼亚大学的研究人员开发了一种方法,可以将单细胞CITE-seq数据映射到CODEX复用IHC图像,以进行空间单细胞多组学研究。

 

CODEX分析试剂和抗体

CODEX分析法通过迭代成像循环靶向抗体组的子集,从而克服了传统的多重免疫荧光技术的挑战,从而在单个组织切片中揭示了40多种生物标志物。

我们提供了完整的解决方案,其中包括针对CODEX系统进行了优化和验证的抗体和试剂。经验证和库存的抗体可用于不同类型的组织:小鼠新鲜冷冻,人新鲜冷冻和人FFPE。用户可以使用Akoya的定制偶联试剂盒灵活地创建由市售的,经Akoya验证的抗体或标有CODEX条形码的克隆组成的面板。

试剂盒和试剂

用于组织染色,自定义缀合和执行CODEX实验的缓冲液和试剂

CODEX抗体

CODEX共轭抗体,用于构建抗体面板

CODEX条码

修饰寡核苷酸,易于偶联定制CODEX抗体

CODEX记者

荧光团偶联的寡核苷酸,用于CODEX抗体的可视化

 

试剂盒和试剂

CODEX分析需要专门配制的试剂和缓冲液,以使用CODEX抗体对组织染色并进行迭代成像循环。对于每个成像周期,将三个带有特定光谱染料的CODEX Reporter应用于染色的组织,以可视化相应的CODEX抗体。该CODEX仪器适用轻柔洗涤步骤去除CODEX记者无任何化学修饰,随后施加下一组记者的想象下一组CODEX抗体。

目录 #

名称

尺寸

700000110X CODEX缓冲区10个反应
7000002CODEX检测试剂10个反应
7000003核染色10个反应
7000008CODEX染色套件10个反应
7000009CODEX偶联试剂盒10个反应
7000010CODEX垫片v210个垫片
232107CODEX存储缓冲区120毫升
7000005盖玻片138
700000696孔板10
700000796孔板密封10
7000013CODEX盖玻片储物盒1盒

 

CODEX抗体

CODEX抗体是单独提供的,可以混合使用并与设计面板匹配,以同时分析多达40多种生物标志物。

Akoya提供经过充分测试的CODEX抗体和一系列补充抗体。

 

CODEX ®盘点抗体

CODEX清单抗体由Akoya提供,并已通过完整的CODEX抗体验证过程和制造质量控制。我们库存的抗体也得到了我们现场支持团队的全面支持。

 

 

CODEX抗体已在多种类型的人类FFPE组织中进行了测试。这些CODEX抗体与不同的CODEX条形码(BX000)结合。每个试剂盒包含一管CODEX抗体和一管相应的染料标记的Reporter(RX000),在标准染色条件下有足够的容量用于25 CODEX运行(或测试)。推荐用于FFPE组织的染料是Atto 550,Cy5和Alexa Fluor™750。

目录 #

名称

尺寸

4450036b-Catenin1-BX020(12F7)-Atto 550-RX02025项测试
4450030CD3e-BX045(EP449E)—Cy5-RX04525项测试
4350018CD4-BX003(EPR6855)—Cy5-RX00325项测试
4250012CD8-BX026(C8 / 144B)-Atto 550-RX02625项测试
4350020CD11c-BX024(118 / A5)—Cy5-RX02425项测试
4150018CD20-BX007(L26)— Alexa Fluor™488-RX00725项测试
4450018CD20-BX007(L26)— Alexa Fluor™750-RX00725项测试
4450027CD21-BX032(EP3093)—阿托550-RX03225项测试
4150017CD31-BX001(EP3095)— Alexa Fluor™488-RX00125项测试
4450017CD31-BX001(EP3095)— Alexa Fluor™750-RX00125项测试
4250002CD44-BX005(IM7)-阿托550-RX00525项测试
4250023CD45RO-BX017(UCHL1)-Atto 550-RX01725项测试
4350019CD68-BX015(KP1)—Cy5-RX01525项测试
4350001CD107a-BX006(H4A3)—Cy5-RX00625项测试
4250021E-cadherin-BX014(4A2C7)-Atto 550-RX01425项测试
4350021组蛋白H3磷酸酯(Ser28)-BX030(HTA28)-Cy5-RX03025项测试
4450029HLA-DR-BX033(EPR3692)—Cy5-RX03325项测试
4450031角蛋白14-BX002(聚19053)—阿托550-RX00225项测试
4250019Ki67-BX047(B56)-Atto 550-RX04725项测试
4450032LIF-BX006(M1506B09)—Cy5-RX00625项测试
4450034Mac2 / Galectin-3-BX035(M3 / 38)-Atto 550-RX03525项测试
4150020泛细胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™488-RX01925项测试
4450020泛细胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™750-RX01925项测试
4250004Podoplanin-BX023(NC-08)-Atto 550-RX02325项测试
4450033TFAM-BX029(18G102B2E11)-Atto 550-RX02925项测试

已经使用扁桃体组织测试了用于人类新鲜冷冻组织的CODEX抗体。这些CODEX抗体与不同的CODEX条形码(BX000)结合。每个试剂盒包含一管CODEX抗体和一管相应的染料标记的Reporter(RX000),在标准染色条件下有足够的容量用于25 CODEX运行(或测试)。推荐用于人类新鲜冷冻组织的染料是Atto 550,Cy5和Alexa Fluor™488。

目录#

名称

尺寸

4250005CD2-BX002(RPA-2.10)-Atto 550-RX00225项测试
4350008CD3-BX015(UCHT1)—Cy5-RX01525项测试
4350010CD4-BX021(SK3)—Cy5-RX02125项测试
4150004CD8-BX004(SK1)—Alexa Fluor™488-RX00425项测试
4450004CD8-BX004(SK1)— Alexa Fluor™750-RX00425项测试
4350012CD11c-BX027(S-HCL-3)—Cy5-RX02725项测试
4350003CD19-BX003(HIB19)—Cy5-RX00325项测试
4150009CD21-BX013(Bu32)-Alexa Fluor™488-RX01325项测试
4450009CD21-BX013(Bu32)-Alexa Fluor™750-RX01325项测试
4250009CD31-BX032(WM59)—阿托550-RX03225项测试
4250020CD34-BX035(561)-阿托550-RX03525项测试
4150007CD38-BX007(HB-7)-Alexa Fluor™488-RX00725项测试
4450007CD38-BX007(HB-7)-Alexa Fluor™750-RX00725项测试
4150003CD45-BX001(HI30)— Alexa Fluor™488-RX00125项测试
4450003CD45-BX001(HI30)— Alexa Fluor™750-RX00125项测试
4250023CD45RO-BX017(UCHL1)-Atto 550-RX01725项测试
4350007CD49f-BX033(GoH3)—Cy5-RX03325项测试
4250022CD69-BX041(FN50)-阿托550-RX04125项测试
4150021CD90-BX022(5E10)-Alexa Fluor™488-RX02225项测试
4450021CD90-BX022(5E10)-Alexa Fluor™750-RX02225项测试
4250008CD104-BX005(58XB4)-Atto 550-RX00525项测试
4150008CD138-BX010(MI15)-Alexa Fluor™488-RX01025项测试
4450008CD138-BX010(MI15)— Alexa Fluor™750-RX01025项测试
4250013CD278-BX017(C398.4A)-Atto 550-RX01725项测试
4250010CD279-BX014(EH12.2H7)-Atto 550-RX01425项测试
4250006HLA-DR-BX026(L243)—阿托550-RX02625项测试
4250019Ki67-BX047(B56)-Atto 550-RX04725项测试
4150020泛细胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™488-RX01925项测试
4450020泛细胞角蛋白BX019(AE-1 / AE-3)-Alexa Fluor™750-RX01925项测试
4250004Podoplanin-BX023(NC-08)-Atto 550-RX02325项测试

 

已使用脾脏组织测试了用于小鼠新鲜冷冻组织的CODEX抗体。这些CODEX抗体与不同的CODEX条形码(BX000)结合。每个试剂盒包含一管CODEX抗体和一管相应的染料标记的Reporter(RX000),在标准染色条件下有足够的容量用于25 CODEX运行(或测试)。推荐用于小鼠新鲜冷冻组织的染料是Atto 550,Cy5和Alexa Fluor™488。

目录#

名称

尺寸

4350014CD3-BX021(17A2)—Cy5-RX02125项测试
4250016CD4-BX026(RM4-5)—阿托550-RX02625项测试
4250007CD5-BX017(53-7.3)-Atto 550-RX01725项测试
4250017CD8a-BX029(53-6.7)-Atto 550-RX02925项测试
4150015CD11b-BX025(M1 / 70)—Alexa Fluor™488-RX02525项测试
4450015CD11b-BX025(M1 / 70)-Alexa Fluor™750-RX02525项测试
4350013CD11c-BX030(N418)—Cy5-RX03025项测试
4250014CD19-BX020(6D5)-Atto 550-RX02025项测试
4250015CD21 / 35-BX023(7E9)-Atto 550-RX02325项测试
4150014CD24-BX022(M1 / 69)—Alexa Fluor™488-RX02225项测试
4450014CD24-BX022(M1 / 69)-Alexa Fluor™750-RX02225项测试
4250001CD31-BX002(MEC13.3)-Atto 550-RX00225项测试
4150013CD38-BX019(90)— Alexa Fluor™488-RX01925项测试
4450013CD38-BX019(90)-Alexa Fluor™750-RX01925项测试
4250002CD44-BX005(IM7)-阿托550-RX00525项测试
4150002CD45-BX007(30-F11)— Alexa Fluor™488-RX00725项测试
4450002CD45-BX007(30-F11)— Alexa Fluor™750-RX00725项测试
4150006CD45R / B220-BX010(Ra3-6B2)-Alexa Fluor™488-RX01025项测试
4450006CD45R / B220-BX010(Ra3-6B2)-Alexa Fluor™750-RX01025项测试
4350007CD49f-BX033(GoH3)—Cy5-RX03325项测试
4350016CD71-BX027(RI7217)—Cy5-RX02725项测试
4450001CD90.2-BX001(30-H12)-Alexa Fluor™750-RX00125项测试
4150001CD90.2-BX001(30-H12)-Alexa Fluor™488-RX00125项测试
4350005CD169-BX015(3D6.112)—Cy5-RX01525项测试
4150012IgD-BX016(11-26c.2a)-Alexa Fluor™488-RX01625项测试
4450012IgD-BX016(11-26c.2a)-Alexa Fluor™750-RX01625项测试
4150011IgM-BX013(RMM-1)-Alexa Fluor™488-RX01325项测试
4450011IgM-BX013(RMM-1)-Alexa Fluor™750-RX01325项测试
4250019Ki67-BX047(B56)-Atto 550-RX04725项测试
4350015Ly6g-BX024(1A8)—Cy5-RX02425项测试
4250003MHC II-BX014(M5 / 114.15.2)-Atto 550-RX01425项测试
4350006TCRb-BX003(H57-597)—Cy5-RX00325项测试
4150005Ter119-BX004(TER-119)-Alexa Fluor™488-RX00425项测试
4450005Ter119-BX004(TER-119)-Alexa Fluor™750-RX00425项测试

CODEX ®屏蔽抗体

Akoya并未列出或提供CODEX筛选的抗体,但包括一系列已纯化并成功与CODEX Barcodes结合并在次级淋巴组织中显示阳性染色信号的克隆。这些克隆可从其他抗体供应商处商购获得,但需要终用户偶联。CODEX条形码和相关的共轭协议可通过Akoya获得。

CODEX ®社区抗体

CODEX用户群在不断增长,我们鼓励跨客户站点的协作,以共享他们经过CODEX测试的克隆和协议的列表。这些CODEX社区抗体虽然证明与CODEX仪器兼容,但不会通过Akoya出售。终用户需要共轭。CODEX条形码和相关的共轭协议可通过Akoya获得。我们正在继续扩大名单。

 

CODEX ®抗体的自定义面板设计

Akoya的CODEX系统为用户提供了灵活性,可以使用自定义偶联试剂盒创建由Akoya验证的抗体或标有CODEX Barcodes的克隆组成的面板。用户可以使用CODEX偶联试剂盒和各个CODEX条形码从第三方抗体供应商处稳健地制备克隆。

 

CODEX条码

CODEX条形码与CODEX偶联试剂盒一起使用,可用于定制抗体面板设计。每个试剂盒均包含一管冻干条形码,用于单个结合反应;两管Reporters,用于优化CODEX抗体滴定和CODEX运行。对于每个条形码,都有足够的体积用于50 µg抗体偶联,根据产量和滴度,可以提供足够的材料用于10至50个染色。

 

 

 

 

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