bmgrp BI-20433说明书

人骨膜素酶联免疫吸附测定| BI-20433

人骨膜素ELISA的亮点：

• 可检测所有已知Periostin亚型的检测
• 根据FDA / ICH / EMEA指南进行了广泛验证
• 包括7种基于人血清的标准品和2个对照

下一个

• 1个
• 2
• 3

分析特征

• 方法

  夹心ELISA，HRP / TMB，12×8孔可分离试纸

• 样品类型

  血清，血浆（EDTA，柠檬酸盐，肝素），尿液，细胞培养上清液

• 样品量

  10 µl /孔

• 测定时间

  2小时/ 2小时/ 1小时/ 30分钟

• 灵敏度

  20 pmol / l（= 1800 pg / ml）

• 标准范围

  0 – 4,000 pmol / l（= 0 – 360 000 pg / ml）

• 转换系数

  1 pmol / l = 91 pg / ml（分子量：91 kDa）

• 特异性

  内源性和重组人骨膜素；所有已知的等位基因。

•  

  中间运行（n = 10）：≤6％CV

  批量分析（n = 5）：≤3％CV

• 监管状况

  仅供研究使用。

• 交叉反应

  由于人Periostin和其他物种的Periostin之间具有高度的序列同源性，因此与食蟹猴，狗和猫Periostin有潜在的交叉反应性。

• 采用

  仅供研究使用。

• 验证数据

  请参阅验证数据选项卡，以了解：精度，准确性，稀释线性，健康供体的值等

产品详情

• 产品总览
• 分析原理

• 典型标准曲线
• 套件组件

人Periostin ELISA产品概述

人Periostin ELISA试剂盒是一个5.5小时的96孔三明治ELISA，用于定量测定人血清和血浆中的Periostin。骨膜素测定法采用基于人血清的标准品，以确保测量生物学上可靠的数据。

人Periostin试剂盒使用具有特征性结合动力学的高度纯化的，表位定位的抗体。

人骨膜素ELISA测定原理

Periostin ELISA试剂盒是一种夹心酶免疫测定法，用于定量测定人血清和血浆样品中的Periostin。

下图说明了Periostin ELISA的原理：

捕获抗体：小鼠抗人Periostin单克隆抗体
检测抗体：多克隆山羊抗人Periostin抗体，生物素标记
目标抗原：人Periostin

一步，将预先稀释的标准品/对照品/样品和生物素化的多克隆山羊抗人Periostin抗体移液到微量滴定条的孔中，并用小鼠单克隆抗人Periostin抗体进行预包被。标准/对照/样品中存在的骨膜素与孔中的预包被抗体结合，并与检测抗体形成三明治。在洗涤步骤中，去除所有非特异性未结合的材料。在第二步中，将结合物（抗生蛋白链菌素-HRP）移入孔中，并与检测抗体反应。在另一个洗涤步骤之后，将底物（TMB，四甲基联苯胺）吸移到孔中。底物的酶催化颜色变化与样品中存在的骨膜素量成正比。使用标准的微量滴定板读数器可以检测到这种颜色变化。使用从标准品获得的值，生成吸光度（光密度，在450 nm处的OD）与标准浓度的剂量响应曲线。直接从剂量反应曲线确定样品中人骨膜素的浓度。

人骨膜素ELISA典型标准曲线

下图显示了人骨膜素ELISA的典型标准曲线。免疫测定针对重组人Periostin肽进行了校准：

人Periostin ELISA试剂盒组件

储存说明： 人Periostin ELISA试剂盒中的所有试剂在4°C（2-8°C）下稳定，直到每种试剂标签上注明的有效期。

使用说明

• 样品收集与储存

• 试剂准备

• 样品制备

• 检测方案

• 计算结果

样品收集与储存

血清，EDTA血浆，肝素血浆，柠檬酸盐血浆，尿液和细胞培养上清液适用于此骨膜素测定。研究期间请勿更改样品类型。我们建议对所有样品，标准品和质控品进行重复测量。列出的样品收集和储存条件旨在作为一般准则。

血清和血浆

使用EDTA，肝素或柠檬酸盐作为抗凝剂，在标准化血清分离管（SST）或标准化血液采集管中收集静脉血样。对于血清样品，让样品在室温下凝结30分钟。根据试管制造商的使用说明离心分离。立即测定采集的样品，或等分试样并保存在-25°C或更低的温度下。脂血或溶血的样品可能会产生错误的结果。样品在四个冻融循环中保持稳定。解冻后的样品应尽快测定。

尿

注意：根据FDA / ICH / EMEA指南进行的用于测量尿液样品中骨膜素的实验未经过*验证。但是，我们的性能检查表明可以使用此ELISA测定尿液样品。

无菌收集当天的一批尿（中游），直接排入无菌容器中。离心除去颗粒物，立即分析或等分并保存在-25°C或更低的温度下。样品解冻不要超过四次。解冻后的样品应尽快测定。

细胞培养上清液

注意：根据FDA / ICH / EMEA指南进行的测量Periostin细胞培养上清液样品的实验未经过全面验证。但是，我们的性能检查表明可以使用此ELISA测定细胞培养上清液样品。 

通过离心去除颗粒，立即进行分析或等分试样，并将样品存储在
-25°C或更低的温度下。样品解冻不要超过四次。解冻后的样品应尽快测定。

试剂准备

洗涤缓冲液

稀释的WASHBUF在4°C（2-8°C）下可以稳定长达一个月。

标准与控制

重构的STD和CTRL在-25°C或更低的温度下稳定，直到标签上标明的失效日期为止。STD和CTRL可以经历一个冻融循环。

在测定之前，必须用ASYBUF（测定缓冲液）将STD / CTRLs稀释1 + 50，例如10 µl STD / CTRL + 500 µl ASYBUF 。

注意：每孔需要150 µl预稀释的STD / CTR1。

样品制备

将样品置于室温并轻轻混合样品，以确保样品均匀。我们建议对所有样品进行重复测量。

测定前，血清和血浆样品必须用ASYBUF（测定缓冲液）稀释1 + 50，例如10 µl样品+ 500 µl ASYBUF。OD仍超过标准范围高点的1 + 50稀释血清和血浆样品可以用ASYBUF进一步稀释。

注意：每孔需要150 µl的预稀释样品。

使用未稀释的尿液和细胞培养上清液样品。OD超出标准范围高点的尿液和细胞培养上清液样品可用ASYBUF（测定缓冲液）稀释1 + 50。

人骨膜素ELISA测定方案

在开始测定之前，请阅读整个方案。

计算结果

使用能够生成四参数对数（4-PL）拟合的市售软件从标准品的吸光度读数构建标准曲线。或者，将标样在x轴上的浓度相对于每种标样在y轴上的平均吸光度作图，并通过图中的点绘制佳拟合曲线。除4-PL以外的曲线拟合算法尚未得到验证，用户需要对其进行评估。

从标准曲线获得样品浓度。如果需要，可以通过应用转换因子（1 pg / ml = 0.011 pmol / l（MW：91 kDa））将pmol / l转换为pg / ml。计算样品的终浓度时，必须考虑1 + 50以上的样品稀释度。对于未稀释的样品，将值除以50，以获得终样品浓度。

套件随附的质量控制（QC）协议显示了生产日期每个套件批次的终版本QC结果。客户获得的OD数据可能会受到各种影响，包括在整个保质期内信号强度正常下降的影响。但是，只要浓度高的标准品的OD为1.50或更高，并且CTRL的值在目标范围内（参见标签），这就不会影响结果的有效性。

背景与治疗领域

骨膜素蛋白

骨膜素（OSF-2）分泌为91 kDa的同型二聚体可溶性细胞外基质蛋白，在富含胶原蛋白的纤维结缔组织中表达。Periostin至少有7种亚型，是由其他剪接引起的（http://www.uniprot。。ｏｒｇ/uniprot/Q15063）。

骨膜素功能

骨膜素参与成骨细胞的募集，附着和扩散。它与癌症中的上皮-间质转化以及在发展中的心脏中的间质分化有关。骨膜素在骨科，组织修复，肿瘤科，心血管和呼吸系统疾病以及各种炎症环境中具有功能。

• 代谢性疾病

  糖尿病性视网膜病（Ding等人，2018）

• 肾脏科

  肾脏纤维化（An等，2018; Hwang等，2017; Mael-Ainin等，2014; Sen等，2011）

  多囊肾（Raman等人，2018; Wallace等人，2014）

  高血压肾病（Guerrot et al。，2012）

  肾脏损伤（Satirapoj等人，2015、2014、2012）

  IgA肾病（Hwang等，2016; Satirapoj等，2014）

• 肿瘤科

  多发性骨髓瘤（Terpos et al。，2016）

  成釉细胞瘤（Kang等人，2018）

  卵巢癌（Ryner等人，2015; Sung等人，2016; Tang等人，2018）

  甲状腺乳头状癌（Giusca et al。，2017）

  头颈癌（Liu et al。，2018）

  乳腺癌（Kim等，2017; Lambert等，2016; Nuzzo等，2016; Ratajczak-Wielgomas等，2017）

  肺癌（Che等，2017; Zhang等，2017）

  骨肉瘤（Hu et al。，2016）

  胃癌（Liu et al。，2016）

  膀胱癌（Silvers et al。，2016）

  前列腺癌（Tian等，2015）

• 骨科

  骨质疏松症（Kim等人，2015; Rousseau等人，2014; Varughese等人，2018; Yan等人，2017）

  佩吉特氏病（Polyzos et al。，2017）

  骨关节炎（Chijimatsu等，2015; Honsawek等，2015b; Rousseau等，2014; Tajika等，2017）

  类风湿关节炎（Kerschan-Schindl等，2018; Sakellariou等，2015）

  强直性脊柱炎（Solmaz u.a.，2018）

• 其他

  伤口愈合

  流产（Freis等人，2017）

  皮肤疾病（Murota等，2017; Sung等，2017）

  肝脏僵硬（Honsawek等，2015）

• 冠心病

  哮喘（Carpagnano等人，2018;Górska等人，2016; Hoshino等人，2016; Inoue等人，2016; Kim等人，2014; Lee等人，2018; Matsusaka等人，2015 ； O'Dwyer和Moore，2017； Song等，2015）

  过敏（富士岛等人，2016;伊豆原等人，2017）

  肺纤维化（Ohta等，2017）

  支气管肺发育不良（Ahlfeld et al。，2016）

文学

Periostin通过p38 MAPK途径在急性肾脏损伤后诱导肾脏纤维化。
An，JN，Yang，SH，Kim，YC，Hwang，JH，Park，JY，Kim，DK，Kim，JH，Kim，DW，Hur，DG，Oh，YK，Lim，CS，Kim，YS，Lee， JP，2018年。上午。J.生理学。肾脏生理学。
PMID：30539653

寻找患有严重哮喘的气管骨膜素：对2型内异型聚类有用吗？
Carpagnano，GE，Scioscia，G.，Lacedonia，D.，Soccio，P.，Lepore，G.，Saetta，M.，Foschino Barbaro，MP，Barnes，PJ，2018。胸部154，1083–1090。
PMID：30336944

血清骨膜素浓度升高与2型糖尿病患者的糖尿病性视网膜病变有关。
丁Y，葛强，曲海峰，冯Z.，龙杰。，魏强。，周Q.，吴，R.，姚L.，邓H.， 2018.内分泌 投资。41，937–945。
PMID：29349642

在成釉细胞瘤发病机理中Periostin表达上调。
Kang，Y.，Liu，J.，Zhang，Y.，Sun，Y.，Wang，J.，Huang，B.，Zhong，M.，2018.《病理科学》。Res。实践 214，1959年-1965年。
PMID：30196986

类风湿关节炎缓解：肌生长抑制素降低，骨膜素血清水平升高。
Kerschan-Schindl，K.，Ebenbichler，G.，Föeger-Samwald，U.，Leiss，H.，Gesslbauer，C.，Herceg，M.，Stummvoll，G.，Marculescu，R.，Crevenna，R.，Pietschmann ，P.，2018年。维也纳。克林 Wochenschr。
PMID：30171335

血清骨膜素水平：甲苯二异氰酸酯诱导的职业性哮喘的潜在血清学标志物。
Lee，JH，Kim，SH，Choi，Y.，Trinh，HKT，Yang，EM，Ban，GY，Shin，YS，Ye，YM，Izuhara，K.，Park，HS，2018.延世医学。J. 59，1214–1221。
PMID：30450856；PMCID：PMC6240562

骨髓间充质干细胞通过雷帕霉素介导的Periostin介导的磷酸肌醇3-激酶/ Akt /哺乳动物靶标促进头颈癌的进展。
Liu，C.，Feng，X.，Wang，B.，Wang，X.，Wang，C.，Yu，M.，Cao，G.，Wang，H.，2018.癌症科学。109，688–698。
PMID：29284199；PMCID：PMC5834805

收集管中的骨膜素过表达会加速多囊肾疾病中的肾囊肿生长和纤维化。
拉曼，A.，帕内尔，SC，张，Y.，Reif，GA，戴，Y.，卡纳，A.，丹尼尔，E.，白色，C. J.生理学。肾脏生理学。
PMID：30332313

卵巢癌细胞与巨噬细胞通过骨膜素的相互干扰促进了巨噬细胞的募集。
Tang M.，Liu，B.，Bu，X.，Zhao，P.，2018.癌症科学。109，1309–1318。
PMID：29527764; PMCID：PMC5980394

小骨折，长骨折和关节置换后的血清骨膜素水平：一项观察性研究。
Varughese，R.，Semprini，R.，Munro，C.，Fingleton，J.，Holweg，C.，Weatherall，M.，Beasley，R.，Braithwaite，I.，2018.过敏性哮喘临床。免疫 关 J.可以 Soc。过敏临床。免疫 14. 
PMID：30065761；PMCID：PMC6060508

慢病毒介导的Periostin沉默通过整联蛋白信号通路对肺癌微环境和骨转移的影响。
车洁。沉文治。邓颖。戴.H。廖雅文。袁新利。张平.2017。科学 182，10-21。
PMID：28601389

流产妇女在怀孕初期的血清骨膜素水平显着改变。
Freis，A.，Schlegel，J.，Kuon，RJ，Doster，A.，Jauckus，J.，Strowitzki，T.，Germeyer，A.，2017。生物学 内分泌醇。RBE 15. 
PMID：29096644; PMCID：PMC5667517

乳头状甲状腺癌在不同组织学变体中异质骨膜素的表达。
Giusca，SE，Amalinei，C.，Lozneanu，L.，Ciobanu Apostol，D.，Andriescu，EC，Scripcariu，A.，Balan，R.，Avadanei，ER，Căruntu，I.-D.，2017. BioMed Res 。诠释 2017，8701386. 
PMID：29435461; PMCID：PMC5757104

实验性抑制骨膜素可减轻肾脏纤维化。
Hwang，JH，Yang，SH，Kim，YC，Kim，JH，An，JN，Moon，KC，Oh，YK，Park，JY，Kim，DK，Kim，YS，Lim，CS，Lee，JP，2017。上午。J. Nephrol。46，501–517。
PMID：29268247

骨膜素在炎症和过敏。
Izuhara，K.，Nunomura，S.，Nanri，Y.，Ogawa，M.，Ono，J.，Mitamura，Y.，Yoshihara，T.，2017年。细胞。大声笑 生命科学 CMLS 74，4293–4303。
PMID：28887633

上皮骨膜素表达与浸润性乳腺癌患者的不良生存相关。
Kim，G.-E.，Lee，JS，Park，MH，Yoon，JH，2017年。PloSOne 12，e0187635。
PMID：29161296；PMCID：PMC5697858

骨膜素在皮肤疾病的发病机理中。
Murota，H.，Lingli，Y.，片山，I.，2017.细胞。大声笑 生命科学 CMLS 74，4321–4328。
PMID：28916993

骨膜素在肺纤维化和气道重塑中的作用。
O'Dwyer，DN，Moore，BB，2017年。Cell。大声笑 生命科学 CMLS 74，4305–4314。
PMID：28918442; PMCID：PMC5659879

单体骨膜素作为特发性肺纤维化的生物标志物的有用性。
大田S.，冈本M.，藤本K.，坂本N.，高桥K.，山本H.，Ku岛H.，石井H.，赤坂K.，小野J. A.Kamei，A.Azuma，Y.Matsumoto，H.Yamaguchi，Y.Aihara，M.，Johkoh，T.，Kawaguchi.A。，Ichiki，M.，Sagara，H.，Kadota，J.- I.，Hanaoka，M.，Hayashi，S.-I.，Kohno，S.，Hoshino，T.，Izuhara，K.，肺纤维化患者诊断开发协会（CoDD-PF），2017年。 12，e0174547。
PMID：28355256；PMCID：PMC5371347

佩吉特氏病少年时期的骨膜素和硬化素水平。
Polyzos，SA，Makras，P.，Anastasilakis，AD，Mintziori，G.，Kita，M.，Papatheodorou，A.，Kokkoris，P.，Terpos，E.，2017。案例矿工。骨代谢。关 J.Ital。Soc。骨质疏松症。矿工。代谢 ke。Dis。14，269-271。
PMID：29263750；PMCID：PMC5726226

骨膜素在乳腺癌细胞中的表达。
Ratajczak-Wielgomas，K.，Grzegrzolka，J.，Piotrowska，A.，Matkowski，R.，Wojnar，A.，Rys，J.，Ugorski，M.，Dziegiel，P.，2017。J.Oncol。51，1300–1310。
PMID：28902360

骨膜素水平与儿童特应性皮炎的严重程度和长期性相关。
Sung，M.，Lee，KS，Ha，EG，Lee，SJ，Kim，MA，Lee，SW，Jee，HM，Sheen，YH，Jung，YH，Han，MY，2017。儿童医学。过敏免疫。关 出版 欧元。Soc。小儿科 过敏免疫。28，543–550。
PMID：28631851

骨膜素对膝骨关节炎滑膜细胞的影响。
Y. Tajika，Moue，T.，Ishikawa，S.，Asano，K.，Okumo，T.，Takagi，H.，Hisamitsu，T.，2017年。Vivo Athens Greece 31，69-77。
PMID：28064223; PMCID：PMC5354150

在中国老年妇女的髋部骨折早期，循环的骨膜素水平与骨密度损失和愈合进展有关。
严洁。骨质疏松症。诠释 J.Establ。结果合作社。欧元。找到了。骨质疏松症。Natl。骨质疏松症。找到了。美国28，2335–2341。
PMID：28382553

血清骨膜素对接受化疗的晚期非小细胞肺癌患者的预测和预后价值。
Zhang，Y.，Yuan D.，Yao，Y.，Sun，W.，Shi，Y.，Su，X.，2017.肿瘤生物学。J. Soc。肿瘤发展生物学。中 39，1010428317698367. 
PMID：28459197

Ahlfeld，SK，Davis，SD，Kelley，KJ，Poindexter，BB，2016年。J.呼吸 暴击 护理医学。194，1430–1433。
PMID：27905846；PMCID：PMC5148145

测量眼泪骨膜素对眼部过敏性疾病的诊断和管理的有用性。
藤岛H.，冈田N.，松本K.，深川K.，五十岚A.，松田A.，小野J.，大田S.，穆凯H.，吉川M. Izuhara，K.，2016年。《过敏临床》。免疫 138，459-467.e2。
PMID：26964692

哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者不同呼吸样品中骨膜素表达的比较研究。
Kórska，M.Maskey-Warzęchowska，Nejman-Gryz，P.Korczyński，P.Prochorec-Sobieszek，M.，Krenke，R.，2016 拱。中 编织。126，124–137。
PMID：26895432

初治类固醇的哮喘患者气道壁厚度与血清骨膜素的关系。
Hoshino，M.，Ohtawa，J.，Akitsu，K.，2016。过敏性哮喘研究。37，225–230。
PMID：27178891

骨膜蛋白的高表达与肿瘤血管生成和骨肉瘤的不良预后密切相关。
Hu F，Shang，X.-F.，Wang，W.，Jiang，W.，Fang，C.，Tan，D.，Zhou，H.-C.，2016。J. Exp。Pathol。97、86–92。
PMID：27028305；PMCID：PMC4840243

尿液骨膜排泄可预测IgA肾病的肾脏结局。
Hwang，JH，Lee，JP，Kim，CT，Yang，SH，Kim，JH，An，JN，Moon，KC，Lee，H.，Oh，YK，Joo，KW，Kim，DK，Kim，YS，Lim ，CS，2016年。J. Nephrol。44，481–492。
PMID：27802442

骨膜素作为诊断小儿哮喘的生物标志物。
井上（T.），明石（K.Akashi），渡边（M.），池田（Y.），池田（Y.），冲绳（S.），本木（T.），铃木（R.），萨加拉（S.），北河，柳田（N.），佐藤（S.）， Ebisawa，M.，Ohta，S.，Ono，J.，Izuhara，K.，Katsunuma，T.，2016年。Pediatr。过敏免疫。关 出版 欧元。Soc。小儿科 过敏免疫。27，521–526。
PMID：27062336

肿瘤细胞衍生的骨膜素调节维持乳腺癌干细胞的细胞因子。
Lambert，AW，Wong，CK，Ozturk，S.，Papageorgis，P.，Raghunathan，R.，Alekseyev，Y.，Gower，AC，Reinhard，BM，Abdolmaleky，HM，Thiagalingam，S.，2016。癌症研究。MCR 14，103-113。
PMID：26507575；PMCID：PMC4715959

异丙肾上腺素诱导胃癌中骨膜素的表达。
刘国新，习慧卿，孙新耀，耿祖杰，杨世伟，陆耀杰，魏， B.，Chen L.，2016.延世医学。J. 57，557–564。
PMID：26996552；PMCID：PMC4800342

基质和上皮骨膜蛋白表达在人类乳腺癌中的预后价值：与临床病理特征和死亡率结果相关。
Nuzzo，PV，Rubagotti，A.，Zinoli，L.，Salvi，S.，Boccardo，S.，Boccardo，F.，2016。BMC癌症
16，95。PMID：26872609; PMCID：PMC4752779

鉴定胞外囊泡性骨膜素是肌肉浸润性膀胱癌的特征。
Silvers，CR，Liu，Y.-R.，Wu，C.-H.，Miyamoto，H.，Messing，EM，Lee，Y.-F.，2016。Oncotarget7，23335–23345。
PMID：26981774；PMCID：PMC5029630

肿瘤微环境中的骨膜素与上皮性卵巢癌的不良预后和铂耐药相关。
Sung，P.-L.，Jan，Y.-H.，Lin，S.-C.，Huang，C.-C.，Lin，H.，Wen，K.-C.，Chao，K.- C.，Lai，C.-R.，Wang，P.-H.，Chuang-M。，Wu，H.-H.，Twu，N.-F.，Yen，M.-S. ，H.iao，M.，Huang，C.-YF，2016。Oncotarget7，4036-4047。
PMID：26716408; PMCID：PMC4826188

新诊断为症状性多发性骨髓瘤的患者，高水平的骨膜素与骨折率增加，MRI弥散性检查，骨重塑异常和疾病进展阶段有关。
E. Terpos，D。Christoulas，E。Kastritis，Bagratuni，T.，Gavriatopoulou，M.，Roussou，M.，Papatheodorou，A.，Eleutherakis-Papaiakovou，E.，Kanellias，N.，Liakou，C ，Panagiotidis，I.，Migkou，M.，Kokkoris，P.，Moulopoulos，LA，Dimopoulos，MA，2016年。《血液癌症杂志》 6，e482。
PMID：27716740; PMCID：PMC5098262

骨膜素在人骨关节炎软骨中的表达及其病理作用。
R. Chijimatsu，R。Kunugiza，Y。，谷山，Y.，Nakamura，N。，富田，T。，吉川，H.，2015年。BMC肌肉骨骼。不和谐 16，215. 
PMID：26289167; PMCID：PMC4545863

血清骨膜素升高与肝脏僵硬和胆道闭锁的临床预后有关。
Honsawek，S.，Udomsinprasert，W.，Vejchapipat，P.，Chongsrisawat，V.，Phavichitr，N.，Poovorawan，Y.，2015a。生物标记。生化。印度 世博会。反应敏感性化学。20，157–161。
PMID：25980529

血浆和滑液骨膜素与影像学膝关节骨关节炎的关系：横断面研究。
Honsawek，S.，Wilairatana，V.，Udomsinprasert，W.，Sinlapavilawan，P.，Jirathanathornnukul，N.，2015b。Jt。骨头脊椎牧师。82，352–355。
PMID：25881760

血浆骨膜素与绝经后妇女的非椎骨骨折明显相关，而与椎骨骨折无关：临床证据表明，骨膜素对骨骼部位的影响不同。Kim，B.-J.，Rhee，Y.，Kim，CH，Baek，KH，Min，Y.-K.，Kim，D.-Y.，Ahn，SH，Kim，H.，Lee，SH， Lee，S.-Y.，Kang，M.-I.，Koh，J.-M.，2015年。骨81，435–441。
PMID：26297442

哮喘的表型与高血清骨膜素水平有关。
松阪（Matsusaka，M.），Ka田（Kabata），H。福永（K.Fukunaga），铃木（Y.），正木（K。），K。 Sayama，K.，Koh，H.，Nakamura，M.，梅田，A.，Ono，J.，Ohta，S.，Izuhara，K.，Asano，K.，Betsuyaku，T.，2015。Allergol。诠释 关 J.Jpn。Soc。Allergol。64，175–180。
PMID：25838094

骨膜素和反应性基质的上调与原发化学耐药性相关，并预测上皮性卵巢癌的临床结果。
Ryner，L.，Guan，Y.，Firestein，R.，Xiao，Y.，Choi，Y.，Rabe，C.，Lu，S.，Fuentes，E.，Huw，L.-Y.，Lackner， MR，Fu，L.，Amler，LC，Bais，C.，Wang Y，2015.临床。癌症研究。关 J.上午 副会长 癌症研究。21，2941–2951。
PMID：25838397

AS患者中的骨膜素循环水平：与临床和影像学变量，炎症标志物和参与骨形成的分子有关。
Sakellariou，GT，Anastasilakis，AD，Bisbinas，I.，Oikonomou，D.，Gerou，S.，Polyzos，SA，Sayegh，FE，2015年。Oxf。Engl。54，908–914。
PMID：25349442

骨膜素是2型糖尿病肾损伤的组织和尿液生物标志物。
B. Satirapoj，S。Tassanasorn，M。Charoenpitakchai，M.，Supasyndh，O.，2015年。PloSOne 10，e0124055。
PMID：25884625; PMCID：PMC4401767

哮喘儿童的血清骨膜素水平与气道对甲乙胆碱和甘露醇的反应过度有关。
Song，J.-S.，You，J.-S.，Jeong，S.-I.，Yang，S.，Hwang，I.-T.，Im，Y.-G.，Baek，H.- S.，Kim，H.-Y.，Suh，D.-I.，Lee，H.-B.，Izuhara，K.，2015年。过敏70，674-681。
PMID：25703927

基质中骨膜素的过度表达与侵略性前列腺癌呈正相关。
田Y，崔春秋，李，QK，拉玛帕纳，FB，陈X.，金，SR，Veltri，R.，嘉，D.，张，Z.，默拉科拉，D.，张H. ，2015年。PloSOne 10，e0121502。
PMID：25781169; PMCID：PMC4362940

血清骨膜素与阿司匹林加重的呼吸系统疾病相关。
Kim，M.-A.，Izuhara，K.，Ohta，S.，Ono，J.，Yoon，MK，Ban，GY，Yoo，H.-S.，Shin，YS，Ye，Y.-M. ，Nahm，D.-H.，Park，H.-S.，2014年。过敏性哮喘免疫。关 出版 上午。Coll。过敏性哮喘免疫。113、314-320。
PMID：25037608

抑制骨膜蛋白表达可防止肾脏炎症和纤维化的发展。
Mael-Ainin，M.，Abed，A.，Conway，SJ，Dussaule，J.-C.，Chatziantoniou，C.，2014。Soc。肾上腺素。25，1724-1736年。
PMID：24578131

血清骨膜素与绝经后妇女的骨折风险相关：OFELY研究的7年前瞻性分析。
卢梭，JC，Sornay-Rendu，E.，Bertholon，C.，Chapurlat，R.，Ganero，P.，2014年。J。Clin。内分泌醇。代谢 99，2533–2539。
PMID：24628551

尿骨膜素作为慢性同种异体移植肾病中肾损伤的生物标志物。
Satirapoj，B.，Witoon，R.，Ruangkanchanasetr，P.，Wantanasiri，P.，Charoenpitakchai，M.，Choovichian，P.，2014。移植。进程 46，135–140。

骨膜素可促进多囊肾疾病中的肾囊肿生长和间质纤维化。
*，DP，白，C.，Savinkova，L.，Nivens，E.，Reif，GA，Pinto，CS，Raman，A.，Parnell，SC，Conway，SJ，Fields，TA，2014年。85，845–854。
PMID：24284511

确定骨膜素是高血压肾病进展/逆转的关键标志。
Guerrot，D.，Dussaule，J.-C.，Mael-Ainin，M.，Xu-Dubois，Y.-C.，Rondeau，E.，Chatziantoniou，C.，Placier，S.，2012。PloSOne 7 ，e31974。
PMID：22403621；PMCID：PMC3293874

骨膜素：进行性肾损伤的新组织和尿液生物标志物在肾小管细胞中诱导协调的间充质表型。
Satirapoj，B.，Wang，Y.，Chamberlin，MP，Dai，T.，LaPage，J.，Phillips，L.，Nast，CC，Adler，SG，2012。拨号。移植。关 出版 欧元。拨号。运输 副会长 - 欧元。仁 副会长 27，2702–2711。
PMID：22167593；PMCID：PMC3471549

骨膜素在肾小球损伤中被诱导并且在间质性肾纤维化中从头表达。
Sen，K.，Lindenmeyer，MT，Gaspert，A.，Eichinger，F.，Neusser，MA，Kretzler，M.，Segerer，S.，Cohen，CD，2011。J.Pathol。179，1756–1767。
PMID：21854746

验证数据

• 校准

• 检测限和灵敏度

• 准确性
• 稀释线性度和平行度

• 特异性

• 交叉反应

• 样品稳定性

• 样本值

• 矩阵比较

所有Biomedica ELISA均根据FDA / ICH / EMEA指南进行了验证。有关我们的验证准则的更多信息，请参阅我们的质量页面以及已发布的验证准则和文献。

显示验证文献

校准

针对重组人Periostin肽对人Periostin免疫测定进行了校准。

人骨膜素ELISA检测下限和灵敏度

为了确定人Periostin ELISA的敏感性，进行了测量检测下限（LOD）和定量下限（LLOQ）的实验。

LOD（也称为检测极限）是可以在背景信号上方（即没有Periostin的情况下测量的信号）高于99％的置信度的低点。将其定义为不含Periostin的样品（三个独立的测量值）的平均反向计算浓度加上测量值标准偏差的三倍。

LLOQ或化验灵敏度是可以准确定量分析物的低浓度。在LLOQ进行准确定量的标准是分析物的回收率在75％至125％之间，变异系数（CV）小于25％。满足这两个标准的骨膜素的低浓度被报告为LLOQ。

测定了人Periostin ELISA的以下值：

人骨膜素ELISA精密度

ELISA的准确度定义为在一个操作员进行的同一实验中（在运行精密度或重复性范围内）和在使用相同样品但由多个操作员进行的使用不同ELISA批处理的多个实验中一致地测量相同浓度的能力。 （批间精度或重现性）。

批内精度

一位操作员通过在一个人骨膜素ELISA批中五次测量两个已知浓度的样品，来评估批内（批内）精密度。

批间精度

通过多个操作员在多个人Periostin ELISA批次中测量两个已知浓度的样品十二次来评估运行间（批间）的精密度。

人骨膜素ELISA准确性

ELISA的准确度定义为可以回收已知浓度样品的准确度。

通过向含有已知浓度内源性Periostin的人样品中添加重组Periostin来测量人Periostin ELISA的回收率。加标浓度的回收率％计算为所测得的值与预期值的百分比。

下表显示了人类Periostin ELISA在不同样品基质中的回收实验摘要：

+显示个别测量

人骨膜素ELISA稀释线性和平行度

稀释线性和平行度的测试确保了含有Periostin的内源和重组样品均表现出剂量依赖性，并且不受基质效应的影响。稀释线性评估了掺入已知浓度的重组分析物的稀释人类样品中的测量准确性。相反，平行性是指人类样品中的稀释线性，并提供证据表明内源性分析物的行为与重组物相同。对于稀释度，评估每种样品类型的线性和平行度，如果结果在预期浓度的20％以内，则认为线性和平行度可以接受。

稀释线性

通过连续稀释加标有10000 pmol / l重组人Periostin的人类样品来评估稀释线性。

下表显示了血清和柠檬酸盐血浆中经系列稀释的重组人Periostin的平均回收率。参考值表示加标前的样品浓度。

平行性

通过用测定缓冲液连续稀释含有内源性骨膜素的人类样品来评估平行性。

下表显示了几种人类样品基质中系列稀释的内源性骨膜素的平均回收率和范围：

显示个别测量

人骨膜素ELISA特异性

ELISA的特异性定义为其专门识别目标分析物的能力。

人Periostin ELISA的特异性通过表位作图和亲和力测定来表征捕获抗体和检测抗体，从而显示出特异性。此外，ELISA的特异性是通过竞争实验确定的，竞争实验可测量抗体特异性结合骨膜素的能力。

该测定法识别重组的和内源的人骨膜素。

表位作图

使用微阵列分析（Pepperprint GmbH）通过表位作图确定抗体结合位点。

确定单克隆捕获抗体结合Periostin（Q15063的AA542-549（Uniprot ID），亚型1）的FAS4结构域中靠近N末端的线性表位。

多克隆检测抗体识别分布在Periostin分子上的多个线性表位（Q15063的A113-121，AA125-132，AA244-250，AA694-701，AA764-771（Uniprot ID），同工型1）。

已经发表了对此Periostin ELISA中使用的抗体识别的表位的定位的详细描述：

夹心ELISA的特征，用于定量所有人类骨膜素同工型。
加德米尔（E.Gadermaier），特萨尔兹（Tesarz），苏修（Suciu），AA-M。，沃维兹（Wallwitz），伯格（G.），希姆勒（Himmler），G。，2018 。实验室 肛门 32（2）。
PMID：28493527

显示表位映射

信号竞争

通过将含有内源Periostin的人类样品与过量的捕获抗体（AB）进行预孵育来进行竞争实验。然后将该混合物中测得的浓度与参考值进行比较，该参考值是从相同样品中进行的，无需预孵育步骤。血清样品的平均竞争率为98％。

显示个别测量

亚型

优化该测定法以检测人骨膜素的所有已知同工型。

交叉反应

由于人骨膜素和其他物种的骨膜素之间的序列同源性高，因此该分析中使用的抗体可能会与小鼠，大鼠，食蟹猴，狗和猫骨膜素发生交叉反应。

样品稳定性

样品制备

我们建议尽快通过离心分离血浆或血清，例如20分钟，以2,000 xg，宜在4°C（2-8°C）下进行。样品可以在4°C（2-8°C）下保存过夜。要长期保存，请等分采集的血浆或血清样品，并保存在-25°C或更低的温度下。

冻融稳定性

通过比较经历了四个冻融循环（F / T）的样品中的骨膜素测量值，测试了内源性骨膜素的稳定性。四个冻融循环后样品浓度的平均回收率为96％。

样品可以经历四个冻融循环。

样本值

显然健康的供者的血清和血浆骨膜素值

为了提供循环Periostin的期望值，测试了一组看似健康的供体的样品。

结果摘要如下所示：

我们建议为每个实验室确定正常范围。

哮喘和心血管疾病组中的骨膜素值

除了看似健康的供体的样本外，还测试了一组哮喘和心血管疾病队列的样本。

实验结果如下所示。

*市售同类产品（Seralab）

矩阵比较

显然健康个体的血清和血浆样本的相关性

制备了14个看似健康个体的样品，作为血清和血浆对，每个样品均来自一个供体。分析样品，并比较样品的浓度。