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creativemolecules 002SS说明书

 更新时间:2021-02-01 点击量:883

creativemolecules 002SS说明书

 

DTSSP-H8/D8

产品信息DTSSP-H8/D8二硫代琥珀酰亚胺丙酸酯12 x 1 mg DTSSP-H8和DTSSP-D8 NO NO OO SO SO xx xx xx xx xNaO SO3Na 3S x = H-DTSSP-H8 x = D-DTSSP-D8目录号:编号:002SS分子式:C14H14N2Na2O14S4/C14D8H6N2Na2O14S4分子量:MW 608/616特征:同位素编码。
水溶性。
化学可裂解。
CID可裂解。
DTSSP-H8/D8是一种水溶性、同双功能、同位素编码的可裂解交联剂二硫代磺基琥珀酰亚胺丙酸酯。
试剂的轻(H8)和重(D8)形式的区别在于重形式的8个氘原子,而不是轻形式的8个氢原子,否则在化学上是相同的。同位素编码能够在质谱中明确检测交联产物。DTSSP-H8/D8的反应产物将在质谱中表现为强度相等的双峰,对应于试剂的轻(H8)和重(D8)形式,以8.05016 Da除以电荷状态(+ 1为8.05,+ 2为4.03,+ 3为2.68等)。
在pH 7-9缓冲液中,N-羟基磺琥珀酰亚胺(NHS)酯主要与伯氨基(-NH2)反应,形成稳定的酰胺键。因此,交联反应应避免使用含胺的缓冲液(Tris、甘氨酸、铵盐等)。
DTSSP具有水溶性,可在水中制备贮备液。为制备50 mM DTSSP-H8/D8储备液,向含有1 mg试剂的预称重管中加入33 μL水。

 使用以下公式计算肽交联物的质量:
[M12+H]+
= [M1+H]+
+[M2+H]+
+172.97310
[M1OH + H]+
= [M1+H]+
+191.99149
[M1i + H]+ =[M1 + H]+
+173.98093
[M1NH2 + H]+
= [M1+H]+
+191.00747
其中,M1、M2-游离肽的质量;M12-肽间交联的质量;M1OH-死端交联的质量;M1i-
肽内交联;M1NH2–死端酰胺的质量(如果用铵盐淬灭反应)。
MS-Bridge(http://prospector.ucsf.edu)桥联元素组成:C6 H6 O2 S2;–OH的修饰元素组成
末端C6 H8 O3 S2;–NH2末端的修饰元素组成:C6 H9 N1 O2 S2。
FLAG(DYKDDDDK)肽试验反应的典型MALDI质谱图见图1。
试剂的轻(H8)型反应产物为:1013–无FLAG肽;1187–肽内交联;1205–
死端交联;2199-肽间交联。
DTSSP-H8/D8交联物可被DTT裂解(图2)(参考文献1)或CID(图3)。在这两种情况下,
仍用H4/D4原子同位素标记交联,并将在光谱中表现为等强度峰的双峰分离
除以电荷状态4.03 Da。与CID一样,裂解可以在CID的两个C-S键中的任何一个发生。
交联剂,导致构成肽间的每个单独肽的两组H4/D4双链被66 Da分开
交联(图3)(参考文献2、3)。

 

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