creativemolecules 008TP说明书
TP1
产品信息Ac-TRTESTDIKRASSREADYLINKER TP1供试肽1 12 x 1 nmol
目录号编号：008TP
配方：C119 H201 N39 O44
分子量：2880.46841
特点：通过酶处理肽内交联，可转化为Lys-Lys典型的肽间交联。
交联产物收率高。
受乙酰化N端保护。
MALDI MS的优化分子量。
供试肽Ac-TRTESTDIKRASSREADYLINKER旨在表征胺反应性交联试剂的交联肽产物。该肽含有两个赖氨酸残基，由于其空间接近性和通过肽N末端氨基乙酰化阻断，可有效交联。胰蛋白酶消化交联肽可去除Ac-TR和ASSR肽先导物
图1.从TP1产生典型Lys-Lys肽间交联的方案。
供试肽TP1以冻干材料的形式提供，装于12个试管中，每个试管含有1 nmol(2.8 μg)肽。TP1的典型测试交联反应可以以与FLAG肽的测试交联试剂反应相似的方式进行（http://www.creativemolecules。。ｃｏｍ/FLAG%20test%20reaction%20procedure.pdf ).可在20 μL 100 mM醋酸三乙胺缓冲液(pH 7.0)(Fluka)中复溶冻干TP1，得到50 μM TP1溶液。可加入等摩尔量的交联剂（即2 μL 0.5 mM水溶液），并允许反应混合物在25 ℃下进行30 min。可选择加入1 μL新鲜制备的1M碳酸氢铵溶液淬灭反应。可加入1 μg胰蛋白酶(Promega)，并将混合物在37 ℃下孵育3小时。可将0.1 μL反应混合物点样至MALDI板上，干燥，用0.1 μL基质溶液（1 mg/mLα-氰基羟基肉桂酸的0.1%三氟一酸50%乙腈溶液）覆盖，干燥并通过MALDI MS进行分析。
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供试肽TP1可用作新交联试剂的标准物质以及交联实验的对照样品，确保在肽交联的所有处理步骤中具有正确的性能。
与BS3-H12/D12交联并用胰蛋白酶消化的TP1的质谱图示例见图2。主要交联产物由死端交联TESTDIKR-BS3-OH、EADYLINKER-BS3-OH和肽间交联TESTDIKR-BS3-EADYLINKER表示，对应质量为1105、1406、2337 Da。
使用以下公式计算肽交联的理论质量：[MipCL + H]+ = 949.49490 + 1250.63754 + Mip[MOHCL + H]+ = 949.49490 + MOH[MOHCL + H]+ = 1250.63754 + MOH，其中MipCL–肽间交联的质量；MOHCL–死端质量c
