jembio 绿豆核酸酶说明书绿豆核酸酶
单链特异性 DNA 和 RNA 核酸内切酶。
描述:
· 去除双链 DNA 中的突出末端,形成可连接的平末端 (1)。
· 适用于修剪DNA或RNA的单链突出末端,不破坏双链结构(2)。
· 用于通过分析绿豆核酸酶抗性 RNA-DNA 杂交体来绘制转录本 (3)。
· 在 cDNA 合成过程中消化发夹结构 (4)。
· 不会切割双链 DNA 中缺口对面的链。
· 需要 Zn2+ 离子才能发挥作用。单位定义:一个单位是使用变性小牛胸腺 DNA 在 37oC 下每分钟生产 1 µg 酸溶性物质所需的酶量。
储存条件:储存于-20oC。
储存缓冲液:10 mM Tris-HCl(pH 7.5,22oC)、0.1 mM 醋酸锌和 50% (v/v) 甘油。
反应缓冲液:30 mM 醋酸钠(pH 5.0,22oC)、30 mM NaCl、1 mM ZnCl2。
注意:在低缓冲和中缓冲中也有效。
检测条件:30 mM 醋酸钠(22oC 时 pH 5.0)、50 mM NaCl、1 mM ZnCl2、0.5 mg/ml 变性小牛胸腺 DNA 和 5% 甘油。在 1 ml 反应体积中,在 37oC 下孵育 10 分钟。
质量控制:检测所有制剂的污染双链 DNase 活性。
参考:
1. Ardelt, W. 和 Laskowski, M., Sr. (1971) Biochem。生物物理学。水库 社区。44,第 5 期,1205-1211。
2. Berk, AJ 和 Sharp, PA (1977) Cell 12, 721-732。
3. Berk, AJ 和 Sharp, PA (1978) Proc。纳特尔。阿卡德。科学。美国 75, 1274-1278。
4. Goodman, HM 和 McDonald, RJ (1979) Methods Enzymol。68、75-90。