价钱： 80.00 美元 货号： ELSP-1

ELISA 蛋白提取、分离和溶解缓冲液

60 ml、1X、pH 7.4 温和的去污剂蛋白质提取缓冲液，可保持 ELISA 样品分离所需的抗体-抗原相互作用。从大多数细胞隔室中提取蛋白质，包括用于 ELISA 样品制备的膜、细胞质和细胞器。  

强调

• 用于 ELISA 样品制备的经过验证的配方。

• 广泛适用于大多数用于 ELISA 样品制备的细胞质、跨膜和细胞外蛋白。

• 方便的预混合 1X 溶液。

• 与 Bradford 等蛋白质浓度测定兼容。

  内容                                                                                                                                       

1. 60 ml ELISA 蛋白提取缓冲液 pH 7.4
   

ELISA 蛋白提取缓冲液含有温和的去污剂，能够溶解细胞膜、溶解大多数膜蛋白并将胞质蛋白悬浮到缓冲液中。 

  方案概述：ELISA 蛋白提取缓冲液                                                                      

1. 为每个 10 厘米培养皿准备 500 µl ELISA 蛋白提取缓冲液，或为 6 孔培养皿中的每个孔准备 200 µl。使溶液冰冷并加入蛋白酶抑制剂，包括丝氨酸蛋白酶抑制剂（如 PMSF）。如果需要，还可以添加通用磷酸酶抑制剂。
   

2. 取出培养基并用 PBS 冲洗细胞 3 次。

3. 在每个 10 厘米的培养皿中加入 500 µl ELISA 蛋白提取缓冲液。旋转培养皿，用 ELISA 蛋白提取缓冲液覆盖细胞，并在冰床上放置 5 分钟。

4. 从培养皿上刮下细胞，然后转移到合适的管中。旋转并轻敲试管数次以溶解膜。您应该观察与基因组 DNA 相对应的纤维材料，这是细胞裂解的指标。如果纤维材料不明显，加入 20 µl ELISA 蛋白提取缓冲液等分试样，旋转并轻敲直到观察到纤维材料。将管子在冰上再放置 15 分钟。 

5. 4 ^o C离心15 分钟，收集上清液，用于 ELISA 检测。蛋白质浓度测定，例如 Bradford 测定，可用于量化总蛋白质浓度。将上清液也可以被存储在-80 ^ö C长术语