zymoresearch D4004说明书
亮点
清洁并浓缩高达5微克的DNA≥ 用0µl洗涤残渣在2分钟内洗脱6µl。
柱设计允许DNA以高浓度洗脱到最小体积的水或TE缓冲液中。
洗脱DNA非常适合用于PCR、DNA测序、DNA连接、核酸内切酶消化、RNA转录、放射性标记、阵列等。
描述
DNA Clean&Concentrator-5是一种PCR纯化试剂盒,可从PCR、核酸内切酶消化、DNA修饰反应、同位素/荧光标记反应等中纯化高达5µg的DNA。该产品有助于去除DNA聚合酶、修饰酶、RNA聚合酶、连接酶、激酶、核酸酶、磷酸酶、,和限制性内切酶,以及游离dNTPs及其类似物,包括放射性标记和荧光衍生物。洗脱DNA适用于PCR、阵列、连接、测序等。
耐洗涤剂性≤5%Triton X-100,≤5%吐温-20,≤5%沙可西,≤0.1%十二烷基硫酸钠
洗脱体积≥ 6微升
设备微量离心机
纯度A260/A280>1.8
来自PCR、核酸内切酶消化、DNA修饰反应、同位素/荧光标记反应等的样本源DNA。
大小范围为50 bp至23 kb
产量≤ 可回收5微克总DNA。对于50bp至10kb的DNA,回收率为70-95%。对于11kb到23kb的DNA,回收率为50-70%。
问题1:有上限和无上限有什么区别?
区别是帽子。列之间的所有其他内容(最大容量、列矩阵等)都是相同的。不确定使用哪一个?这主要取决于偏好。有些人喜欢有盖的色谱柱,以便于标记或增加安全性,而另一些人喜欢无盖色谱柱,以加快样品处理。
问题2:DNA样本的最小输入量是多少?
使用低于50µl的体积可能会导致回收率降低。Zymo研究建议用水将起始体积提高到100µl,以确保最佳结合条件。
问题3:可以重新加载多少次列?
Zymo Research建议重新加载色谱柱不超过5次,因为绑定效率可能会降低。
问题4:如果柱上装载的DNA超过规定的最大结合容量,会发生什么情况?
由于硅胶基质堵塞,色谱柱过饱和可能导致DNA总损失。
问题5:如何处理储存在DNA/RNA的裸DNA?
向样品中加入等量的乙醇(95-100%),并充分混合。样品已准备好结合,不需要DNA结合缓冲液。继续执行步骤2。
问题6:可以回收的DNA的下限和最小量是多少?
皮克级的DNA可以恢复。该限制基于检测方法的灵敏度。
问题7:如果在开始之前没有向DNA清洗缓冲液中添加乙醇,我该怎么办?
在清洗步骤中,DNA将从柱上洗脱。使用适当量的DNA结合缓冲液重新绑定样本,并使用适当制备的洗涤缓冲液清洗柱。