genelink凝胶纯化产品简介
如果应用是用于 PCR 或测序，所有短于 40mer 的 Gene Link 寡核苷酸通常不需要任何进一步的纯化。强烈建议将凝胶纯化用于涉及产品克隆的所有应用，例如诱变、克隆或基因构建应用。不建议使用反相柱或 HPLC 纯化。
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| * 不建议对超过 35mer 的寡核苷酸进行反相柱纯化。 |
| 纯化 | ||
| 产品 | 目录号 | 价格 $ |
| 聚丙烯酰胺凝胶纯化；50 & 200 nmol 规模 | 26-6400-77 | 75.00 |
| 聚丙烯酰胺凝胶纯化；1 m摩尔刻度 | 26-6400-55 | 150.00 |
| 聚丙烯酰胺凝胶纯化；2 m摩尔刻度 | 26-6400-88 | 280.00 |
| 聚丙烯酰胺凝胶纯化；10 m摩尔刻度 | 26-6400-44 | 1500.00 |
| 聚丙烯酰胺凝胶纯化；15 m摩尔刻度 | 26-6400-99 | 1800.00 |
| 反相筒纯化；50 & 200 nmol 规模 | 26-6400-11 | 30.00 |
| 反相筒纯化；1 m摩尔刻度 | 26-6400-22 | 90.00 |
| 反相筒纯化；2 m摩尔刻度 | 26-6400-23 | 170.00 |
| 反相筒纯化；10 m摩尔刻度 | 26-6400-33 | 750.00 |
| 反相筒纯化；15 m摩尔刻度 | 26-6400-34 | 900.00 |
寡核苷酸纯化
DNA 的自动化化学合成得到了迅速改进，化学方面取得了巨大的进步，使常规偶联产率超过 99%，并且每个合成周期不到 3 分钟的自动化非常可靠。在 20-30 聚体范围内获得的最终寡核苷酸产物基本上是纯的，具有非常低的截短序列，因此对于大多数涉及聚合酶链式反应 (PCR*) 和 DNA 测序的常规应用不需要进一步纯化。其他应用可能需要纯化，建议用于克隆、定点诱变、连接等。
寡核苷酸的纯化可以通过多种方法完成，根据具体要求进行选择。可用和经常使用的常用技术是聚丙烯酰胺凝胶纯化 (PAGE)、HPLC 和反相柱 (RPC)。下表总结了上述每种技术的纯化范围。
| 页 | 高效液相色谱 | RPC | |
| 8-40mer | 是的 | 是的 | 是的 |
| 41-200mer | 是的 | 不 | 不 |
聚丙烯酰胺凝胶纯化
这种方法的纯化被认为是寡核苷酸纯化的黄金标准。PAGE 纯化可用于任何长度的寡核苷酸（与仅限于寡核苷酸的 HPLC 和 RPC 柱相比，优选低于 35 聚体）。这种技术也是劳动强度高的方法。制备适当百分比的聚丙烯酰胺凝胶 (10-20%) 并对寡核苷酸进行电泳。主要产物是最慢的迁移带，通过紫外线阴影识别并切除。然后凝胶切片通常通过压碎和浸泡法进行寡核苷酸洗脱处理。
高效液相色谱
HPLC 纯化通常基于利用疏水基质的反相。寡核苷酸是用三苯甲基 ON（合成寡核苷酸最后一个碱基的 5' OH 处的三苯甲基）合成的，洗脱图谱首先洗脱所有非三苯甲基化截短序列，然后洗脱疏水结合的全长寡核苷酸。该方法产生大于 95% 的纯度，具体取决于寡核苷酸的序列和长度。基于反相的 HPLC 在 35-40mer 寡核苷酸以上失败，因为较长的寡核苷酸本质上是疏水的并且非特异性结合。
反相墨盒
这是 HPLC 反相纯化的廉价替代品。用于反相纯化的小柱通常包含疏水性基质，例如 C18 二氧化硅，纯化原理与 HPLC 相同，根据寡核苷酸的序列和长度，纯化可达到约 95% 的纯度。基于反相柱的纯化在 35-40mer 寡核苷酸以上也失败，因为较长的寡核苷酸本质上是疏水的并且非特异性结合。
推荐
如果应用是用于 PCR 或测序，所有短于 40mer 的 Gene Link 寡核苷酸通常不需要任何进一步的纯化。强烈建议将凝胶纯化用于涉及产品克隆的所有应用，例如诱变、克隆或基因构建应用。不建议使用反相柱或 HPLC 纯化。
价目单价目表
| 纯化 | |||||
| 50纳摩尔 | 200 毫摩尔 | 1毫米摩尔 | 10米摩尔_ | 15米摩尔_ | |
| 凝胶纯化 | 75.00 美元 | 75.00 美元 | $150.00 | $1500.00 | $1500.00 |
| 反相墨盒 (RPC) | $30.00 | $30.00 | $90.00 | $750.00 | $750.00 |
**聚合酶链式反应 (PCR) 过程受保护
霍夫曼-拉罗氏。使用授权试剂自动授予执行许可。
