biosb BSB-3771-3说明书
TintoFast Ki-67 Antibody Immunohistochemistry on a Frozen Acetone-fixed Squamous Cell Carcinoma Tissue
| 可能的使用 | 用于莫氏体外诊断 | |||||||||||||||||||||||||||
| 总结与说明 | Ki-67 蛋白是增殖的细胞标志物。它与细胞增殖密切相关。在间期，Ki-67 抗原只能在细胞核内检测到，而在有丝分裂中，大部分蛋白质被重新定位到染色体表面。Ki-67 蛋白存在于细胞周期的所有活动阶段（G1、S、G2 和有丝分裂），但在静息细胞 (G0) 中不存在。 TintoFast Ki-67 抗体是确定给定细胞群生长分数的标记。Ki-67 阳性肿瘤细胞的比例（Ki-67 标记指数）通常与癌症的临床病程相关。在这方面研究得好的例子是前列腺癌和乳腺癌。 | |||||||||||||||||||||||||||
| 抗体类型 | 兔单克隆 | 克隆 | RM360 | |||||||||||||||||||||||||
| 同型 | IgG | 反应性 | 石蜡，冷冻 | |||||||||||||||||||||||||
| 本土化 | 核 | 控制 | 睾丸，扁桃体，骨髓，胎盘，结肠，。扁桃体、输卵管、星形细胞瘤、乳腺癌、结肠癌 | |||||||||||||||||||||||||
| 介绍 | TintoFast Ki-67 是一种兔单克隆抗体，来源于细胞培养上清液，经过浓缩、透析、过滤灭菌和稀释在 pH 7.5 的缓冲液中，含有 BSA 和叠氮化纳作为防腐剂。 | |||||||||||||||||||||||||||
| 可用性 |
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莫氏冷冻组织的标本制备
将标本嵌入 OCT 中的低温恒温器内。
在 4-5 µm 处切割切片并安装在带正电的载玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus 载玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 盖间隙载玻片 (BSB 7006) 的下三分之一处。
在室温下风干载玻片 2 分钟，然后在培养箱或干浴中在 60°C 下孵育载玻片 3 分钟。
在室温下用丙酮固定 2 分钟，然后让载玻片风干。
莫氏冷冻组织的预处理
将 TintoDetector 培养箱预热至 110 °C。
将 TintoDetector Cap Gap 载玻片 (BSB 7006) 面对面放置，然后将它们插入 TintoDetector 载玻片支架 (BSB 7003)。
将载玻片浸入含 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 中，通过毛细作用提取足够的溶液以覆盖组织。
在预热的 TintoDetector 培养箱中加热载玻片 3 分钟。
将载玻片转移至室温并冷却 1 分钟。
莫氏 IHC 检测
HIER 后，将载玻片转移到 ImmunoDNA 清洗机，静置 1-2 分钟。
对于手动染色，在环境温度下进行抗体孵育。对于自动染色方法，请根据仪器制造商的说明进行抗体孵育。
用 ImmunoDNA 洗涤器或去离子水清洗载玻片。
继续 IHC 检测协议。用 ImmunoDNA 洗涤液在每个步骤之间清洗载玻片。
HRP Green 免疫组化方案的缩写 Mohs PolyDetector Plus DAB HRP Brown
与一抗孵育 5 分钟
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
用 M/R 链接孵育 4 分钟
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
HRP 标签 4 分钟。
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
准备
DAB Brown（在 1ml DAB 缓冲液中加入 1 滴 DAB Chromogen；充分混合）
或 HRP Green（在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen；充分混合）
用 DAB 或 HRP Green 孵育 1-2 分钟
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
用苏木精或核固红复染 30 秒
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
使用 AquaMounter 安装或使用 Fast ChromoProtector 使组织脱水，然后使用 PermaMounter 安装
| 步 | Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 20 分钟协议 |
| 希尔 | 3 分钟。 |
| 一抗 | 5分钟。 |
| 第一步检测 | 4分钟。 |
| 第二步检测 | 4分钟。 |
| 底物色原 | 1-2 分钟。 |
| 复染/盖玻片 | 变化 |
此协议也可用于使用柠檬酸盐或 EDTA 检索的 FFPE 组织。
