biosb BSB 3669说明书
TintoFast 细胞角蛋白 7 对冷冻丙酮固定的乳腺外佩吉特病组织的免疫组织化
| 有可能的使用 | 用于莫氏体外诊断 | |||||||||||||||||||
| 总结与说明 | TintoFast Cytokeratin 7 (CK7) 与泌尿道和胆管上皮细胞的大多数导管、腺体和移行上皮细胞中的蛋白质发生反应。CK7 区分染色阳性的肺和乳腺上皮细胞，以及阴性的结肠和前列腺上皮细胞。 TintoFast Cytokeratin 7 还与许多良性和恶性上皮病变（例如，卵巢、乳腺和肺腺癌）发生反应。此外，在冷冻切片中，该抗体已被证明可以标记睾丸中的网状上皮、附睾上皮以及胃和十二指肠的表面上皮。移行细胞癌为阳性，前列腺癌为阴性。该抗体不识别中间丝蛋白，也不识别血管、结缔组织等非上皮组织。 | |||||||||||||||||||
| 抗体类型 | 小鼠单克隆 | 克隆 | OV-TL 12/30 | |||||||||||||||||
| 同型 | IgG1/K | 反应性 | 石蜡，冷冻 | |||||||||||||||||
| 本土化 | 细胞质 | 控制 | TCC、EMPD | |||||||||||||||||
| 介绍 | Anti – Cytokeratin 7 是一种小鼠单克隆抗体，来源于细胞培养上清液，经过浓缩、透析、过滤灭菌并在 pH 7.5 的缓冲液中稀释，其中含有 BSA 和叠氮化纳作为防腐剂。 | |||||||||||||||||||
| 可用性 |
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莫氏冷冻组织的标本制备
将标本嵌入 OCT 中的低温恒温器内。
在 4-5 µm 处切割切片并安装在带正电的载玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus 载玻片 (BSB 7028) 或 TintoDetector 盖间隙载玻片 (BSB 7006) 的下三分之一处。
在室温下风干载玻片 2 分钟，然后在培养箱或干浴中在 60°C 下孵育载玻片 3 分钟。
在室温下用丙酮或 10% NBF 固定 2 分钟。如果使用 Bio SB Mohs ImmunoDigestor，使用 10% NBF 10% 会产生更好的形态。
对于固定在丙酮中的载玻片，让它风干。对于 NBF 中的幻灯片，用蒸馏水冲洗并风干。
莫氏冷冻组织的预处理
将载玻片转移到 ImmunoDNA Washer、TBST 或 PBST 缓冲液中。
使用 Mohs ImmunoDigestor 进行 PIER、蛋白水解消化 1 分钟。在室温下。
用 ImmunoDNA Washer、TBST 或 PBST 缓冲液冲洗。
IHC 检测程序
PIER 后，将载玻片转移至 ImmunoDNA 清洗机，静置 1-2 分钟。
对于手动染色，在环境温度下进行抗体孵育。对于自动染色方法，请根据仪器制造商的说明进行抗体孵育。
用 ImmunoDNA 洗涤器或去离子水清洗载玻片。
继续 IHC 检测协议。用 ImmunoDNA 洗涤液在每个步骤之间清洗载玻片。
缩写 Mohs PolyDetector DAB HRP Brown of HRP Green 免疫组化方案
用过氧化物酶阻滞剂孵育载玻片 30 秒
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
与一抗孵育 4 分钟
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
用 HRP 标签孵育 3 分钟
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
准备
DAB Brown（在 1ml DAB 缓冲液中加入 1 滴 DAB Chromogen；充分混合）
或 HRP Green（在 1 ml HRP Green Buffer 中加入 1 滴 HRP Green Chromogen；充分混合）
用 DAB 或 HRP Green 孵育 2 分钟
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
用苏木精或核固红复染 30 秒
用缓冲液（TBST 或 PBST）清洗
使用 AquaMounter 安装或使用 Fast ChromoProtector 使组织脱水，然后使用 PermaMounter 安装
| 步 | Mohs PolyDetector HRP Green 或 DAB 协议 |
| 过氧化物酶阻滞剂 | 30秒 |
| 一抗 | 4分钟。 |
| 第一步检测（HRP 标签） | 3 分钟。 |
| 底物色原 | 1-2 分钟。 |
| 复染/盖玻片 | 变化 |
此协议也可用于使用柠檬酸盐或 EDTA 检索的 FFPE 组织。
