Mohs IHC 程序

莫氏冷冻组织的标本制备

1. 将标本嵌入 OCT 中的低温恒温器内。

2. 在 4-5 µm 处切割切片并安装在带正电的载玻片上，例如 Bio SB Hydrophilic Plus Slides (BSB 7028) 或 TintoDetector Cap Gap Plus (BSB 7006)。

3. 在室温下风干载玻片 2 分钟，然后在培养箱或干浴中在 60°C 下孵育载玻片 3 分钟。

4. 在 100% 丙酮中固定并风干或在室温下用 10% NBF 固定 2 分钟，然后用蒸馏水冲洗并风干。

5. 冷冻组织预处理取决于感兴趣的目标。请参阅产品说明书中的一抗以确定适当的预处理方案。

莫氏冷冻组织的组织预处理程序

1. 
   

1. 使用 Bio SB ImmunoDNA Retriever with Citrate (BSB 0020-BSB 0023)、ImmunoDNA Retriever with EDTA (BSB 0030-BSB 0033) 或 Mohs ImmunoDigestor (BSB 0324-0326) 对组织进行表位修复。建议用户选择使用 110°C 压力锅 (BSB TintoRetriever Pressure Cooker) 的 5 分钟热诱导表位修复 (HIER) 方法，或 1 分钟蛋白水解诱导表位修复 (PIER) 方法（用于细胞角蛋白使用 10% NBF 固定组织）。10% NBF 固定组织的形态学较好，尤其是在使用蛋白水解诱导表位修复方法时，然而，在 100% 丙酮固定组织上可能更容易检测到抗原。

2. 可以使用三种 HIER 方法中的任何一种：

一个。TintoRetriever 压力锅或同等产品

将组织/载玻片放入装有含有柠檬酸盐或 EDTA 或 TintoDeparaffinator 柠檬酸盐或 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 的染色盘或 coplin 罐中，然后放在高压锅的三脚架上。在压力锅中加入 1-2 英寸的蒸馏水，然后将热量调高（110-121°C）。孵育 15 分钟。释放蒸汽，打开并立即将载玻片转移至室温。

湾。TintoRetriever PT 模块或水浴法

在 95°-99°C 下将组织/载玻片放入预热的染色皿或装有 ImmunoDNA Retriever with Citrate or EDTA 或 TintoDeparaffinator Citrate or EDTA 的染色皿中。孵育 30-60 分钟。立即打开并将载玻片转移至室温。

C。传统蒸锅法

将组织/载玻片放入预热的染色盘或装有柠檬酸盐或 EDTA 或 Tintodeparaffinator 柠檬酸盐或 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 的染色皿或 coplin 罐中，盖上盖子并蒸 30-60 分钟。热处理后，将载玻片转移到含有柠檬酸盐或 EDTA 或 Tintodeparaffinator Citrate 或 EDTA 的 ImmunoDNA Retriever 中至室温并静置 15-20 分钟。

3. 对于PIER，在室温下使用 Mohs ImmunoDigestor (BSB 0324-0326) 1 分钟，然后清洗。

IHC 检测程序

1. 在 HIER 或 PIER 之后，将载玻片转移到 ImmunoDNA 清洗机并静置 1-2 分钟。

2. 对于手动染色，在环境温度下进行抗体孵育。对于自动染色方法，请根据仪器制造商的说明进行抗体孵育。

3. 用 ImmunoDNA 洗涤器或去离子水清洗载玻片。

4. 继续 Mohs IHC 检测方案。用 ImmunoDNA 洗涤液在每个步骤之间清洗载玻片。

缩写 Mohs 免疫组化方案