Sulfo-NHS-LC-生物素说明书

　更新时间：2022-09-15　点击量：483

Sulfo-NHS-LC-生物素说明书

目录号

A8003

apexbt A8003 胺反应性生物素化试剂，长链

100毫克

背景

Sulfo-NHS-LC-biotin (Sulfosuccinimidyl 6-(biotinamido) Hexanoate) 是一种胺反应性生物素化剂。作为 NHS-LC-生物素的水溶性类似物，Sulfo-NHS-LC-生物素在 NHS 环结构上含有一个带负电荷的磺酸基，在分子内产生足够的极性，使其可以直接加入到水性反应中而无需预先溶解有机溶剂。Sulfo-NHS-LC-生物素通过其 NHS 酯与蛋白质和其他分子中的胺基共价结合，形成酰胺键并释放 N-羟基琥珀酰亚胺。Sulfo-NHS-LC-生物素在共价修饰分子和双环生物素环之间的长度 (22.4 A) 比 NHS-生物素 (13.5 A) 更长，这为探针提供了更大的机会到达深埋在内部的结合位点蛋白质的表面平面。

参考

生物共轭技术，第 2 版。作者：Greg T.Hermanson（Pierce Biotechnology，Thermo Fisher Scientific，Rockford，IL）。学术出版社（Elsevier 的印记）：伦敦、阿姆斯特丹、伯灵顿、圣地亚哥。2008. 国际标准书号 978-0-12-370501-3。

产品引用

1. 岳西华，Neeraj Tiwari，等。“Tankyrase-1 介导的 Golgin45 降解以 Rab2-GTP 依赖性方式调节糖基转移酶运输和蛋白质糖基化。" 通讯生物学。2021 年 12 月 7 日；4(1):1370。 PMID:34876695
2.贾J，岳X，等。“KDEL 受体是一种细胞表面受体，通过网格蛋白介导的运输载体在质膜和高尔基体之间循环。" 细胞分子生命科学。2020；10.1007/s00018-020-03570-3。 PMID:32562023
3. 吴中，何德，等。“用于检测铜绿假单胞菌的双峰（SERS 和比色）适体传感器。" 米克罗希姆学报。2018 年 10 月 31 日；185(11):528。 PMID:30382404
4.舒F，陈J，等。“胆固醇晶体介导的炎症是由血浆膜不稳定驱动的。" 前免疫。2018 年 5 月 29 日；9:1163。 PMID:29896195
5. Lorin、Charlotte、Isabelle Vögeli 和 Ernst Niggli。“营养不良性心肌病：TRPV2 通道在拉伸诱导的细胞损伤中的作用。" 心血管研究 106.1 (2015): 153-162。 PMID:25616416

特征

• 蛋白质标记— 生物素化抗体，以促进使用链霉亲和素树脂或探针进行固定、纯化或检测
• 细胞表面标记 —不穿透质膜，仅对整个细胞的表面蛋白质进行生物素化
• 胺反应性— 与伯胺 (-NH2)反应，例如赖氨酸侧链，或 N-末端胺
• 可溶性——与普通 NHS 酯化合物相比，带电荷的磺基-NHS 基团增加试剂水溶性
• 不可逆——形成酰胺键；间隔臂不能被切割
• 中等长度——间隔臂为 22.4 埃；在足够的长度（生物素结合的空间位阻最小）和适中的质量之间提供出色的平衡

化学性质

贮存	-20°C储存本品在溶液中不稳定，使用前请立即溶解。
重量	556.6
CAS号	127062-22-0
公式	C 20 H 29 N 4 NaO 9 S 2
同义词	生物素氨基己酸3-磺基-N-羟基琥珀酰亚胺酯钠盐
化学名称	2,5-二氧代-1-[6-[5-(2-氧代-1,3,3a,4,6,6a-六氢噻吩并[3,4-d]咪唑-4-基)戊酰氨基]己酰氧基]吡咯烷-3-磺酸；钠
自卫队	下载自卫队
典型的微笑	C1C(C(=O)N(C1=O)OC(=O)CCCCCNC(=O)CCCCC2C3C(CS2)NC(=O)N3)S(=O)(=O)O.[Na]
运输条件	用蓝冰运送，或根据其他要求运送。
一般提示	为获得更高的溶解度，请将试管加热至 37°C，并在超声波浴中摇晃片刻。我们不建议长期储存溶液，请尽快用完。

协议

生物素化方法[1]：
样本	心肌细胞
制备方法	溶于水、DMSO 或 DMF。
反应条件	0.5 mg/ml，37ºC 2 小时
应用	Sulfo-NHS-LC-生物素以 0.5 mg/ml 的浓度溶解在 PBS 中。然后将其与心肌细胞在 37ºC 下孵育 2 小时。之后，将细胞在含有 100 mM 甘氨酸的冷 PBS 中洗涤两次，并在单独的冷 PBS 中洗涤两次，以去除多余的生物素试剂。为了捕获生物素化的蛋白质，将 100 μl 链霉亲和素琼脂糖树脂与每 100 μg 样品在 4ºC 下孵育 16 小时。使用含有 40 mg/mL 二硫苏糖醇的 Laemmli 2X 样品缓冲液在 60ºC 下洗脱捕获的蛋白质 30 分钟，并使用一抗进行蛋白质印迹分析。