HA Tag CUTANA™ CUT&RUN Antibody
产品概述
类型:多克隆
主机:兔
目标大小:不适用
格式:亲和纯化 IgG
反应:HA表位(YPYDVPDYA)
应用:切割和运行,WB
HA 抗体 (0.5 μg) 和 500,000 个 MDA-MB-231 细胞稳定表达 c 端 3xHA 标记的 GATA3 [1]*.使用MACS2调用峰值。(一)显示GATA3-3xHA峰的热图 相对于 IgG 和 H3K4me3 对照抗体(分别为 EpiCypher 13-0042 和13-0041),按强度排列(顶部至 底部)并着色,红色表示高度本地化 富集和蓝色表示背景信号。(二)GATA3-3xHA峰值的数量 属于功能注释基因组的不同类别 绘制区域。
A)荷马分析中的分析确定 GATA3 共识主题,表示为序列徽标 位置权重矩阵,在GATA3-3xHA下富集 切割和运行峰值。(二)GATA3-3xHA的数量 含有来自图A的GATA3共识基序的峰是 由维恩图表示。(中四)二 代表性位点显示GATA3-3xHA峰与 下面提到的共识主题(IGV)。
(A)一组重组核小体 创建其中各种表位标签(3xTY1,3xFLAG,3xHA) 融合到组蛋白H3尾部。融合的核小体和 将未修饰的对照固定在链霉亲和素珠上 (SA Bead)并与ConA一起加标到CUT&RUN样品中 磁珠固定3xHA MDA-MB-231细胞(图1)。高可用性标签 然后加入抗体和pAG-MNase(EpiCypher15-1016)以释放抗体结合的核小体 通过pAG-MNase介导的裂解进入溶液 接头DNA(浅蓝色)。这种方法提供了一个定义的 实验对照以评估HA Tag抗体是否 选择性切割具有高特异性的靶表位 和最小的背景。(二)CUT&RUN序列读数与独te的DNA比对 “条形码"对应于刺入中的每个核小体 面板。数据表示为恢复的读取百分比 相对于预期目标(3xHA,设置为 100%)。这 分析证实HA标签抗体特异性 将靶表位标记的核小体释放到 溶液。
多标签融合蛋白的大肠杆菌细胞蛋白 用于制备全细胞裂解物。指示的 将一定量(ng)的裂解物上样到4-20%SDS-PAGE凝胶上 并在标准蛋白质印迹条件下使用 HA 进行分析 标记抗体 (1:25,000)。
免疫原
合成的HA肽(序列:YPYDVPDYA)。
配方
磷酸盐中的抗原亲和纯化抗体 (1.0 mg/mL) 缓冲盐水(PBS),0.09%sodium azide。
储存和稳定性
自收到之日起在 4°C 下稳定保存 1 年。
推荐稀释度:
切割和运行:0.5 微克
蛋白质印迹 (WB):1:1,000 - 1:30,000
背景参考文献:
[1] Takakuet al.基因组生物学.(2016). PMID:26922637
*感謝 Takaku 博士 (UND) 的 3xFlag-GATA3-3xHA MDA-MB-231 细胞。
产品详情
名称 HA Tag CUTANA™ CUT&RUN Antibody
编号 13-2010
品牌 epicypher